阿利吉仑抑制心力衰竭大鼠心肌代谢重构的机制研究.docxVIP

阿利吉仑抑制心力衰竭大鼠心肌代谢重构的机制研究 近年来的研究表明，肾素-血管紧张素-环境格致素（raas）对心力衰竭的发生和发展起着重要作用。抑制raas系统的激活是治疗心力衰竭的重要手段。现阶段的药物治疗主要是血管紧张素受体阻滞剂（gai）和血管紧张素受体抗剂（arb）药物，这些药物阻断了raas系统，改善了心率，并减少了心力衰竭。 1 大鼠超声心动图检测 1.1材料雄性Sprague-Dawley大鼠40只,体质量150~200g,赣南医学院动物实验中心提供,分为4组,每组10只, 即对照组、异丙肾上腺 素 (ISO)(ISO组)、贝那普利 (BH,BH组)和AL组。 1.2主要药物及试剂AL为瑞士诺华公司产品;BH为瑞士诺华公司产品;ISO为上海禾丰制药有限公司产品;血浆血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、AngⅡ放射免疫分析盒为北京福瑞生物工程公司产品;辣根过氧化物酶标记的兔抗大鼠一抗金属蛋白酶 (MMPs)、金属蛋白酶抑制因子(TIMP)由Santa Cruz公司提供;二抗(生物素化羊 抗兔IgG)由北京中 衫金桥生 物公司提 供。 1.3方法 1.3.1模型制备BH组给予含BH的混悬液灌胃,给药量5 mg·kg 1.3.2心脏超声 检查大鼠 以0.3% 戊巴比妥 钠溶液 (10 mL/kg)腹腔注射麻醉后备皮,应用超声心动仪(西门子ACUSON Sequoia512)及5-12 MHz高频线控探头(西门子公司)进行超声检测,检测左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径 (LVESD)、左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(FS)。 1.3.3心肌组织病理学检查取大鼠左心室心尖部心肌,4% 甲醛固定后常规切片,HE染色以备光镜下观察;2.5%戊二醛固定后电镜下观察。 1.3.4大鼠心脏指数测定用预冷的生理盐水洗去心脏残留血液,剪去周围结缔组织和血管,滤纸吸干水分称量心脏湿质量。心脏指数=心脏湿质量/体质量。 1.3.5大鼠血浆PRA、AngⅡ浓度的测定处死大鼠后从其心脏取血,将其放入冰水 中冷却的 酶抑制剂 抗凝管中 (50μL EDTA-2Na、50μL 8-羟基喹啉、25μL二硫基丙酸)摇匀放回冰水中冷却,将其放入离心机中离心,1 500r/min,4 ℃离心5 min,吸出血浆,采用放射免疫法测定AngⅠ、AngⅡ,具体步骤参考说明书;血浆中PRA的测定以AngⅠ的生成率代替,具体步骤如下:取双份血浆分为对照管、测定管,对照管在4℃下测定AngⅠ浓度,测定管在37 ℃ 下温育30 min,测定AngⅠ 浓度,AngⅠ生成率=(测定管浓度-对照管浓度)/温育时间。 1.4统计学处理统 计学分析 应用SPSS10.0统计软件 完成。计量资料用x±s表示,组间比较采用方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,以P0.05为差异有统计学意义。 2 对大鼠心肌组织病理学理变化的影响 2.1各组大鼠二维超声心动图比较与对照组相比,ISO组大鼠心脏 的LVEDD明显变大,LVEF明显减退(P0.01)。 BH组、AL组较ISO组各项指 标均显著 改善 (P0.05)。与BH组相比,AL组各项指标均显著改善(P0.05),见表1。 2.2各组大鼠心肌病理切片比较心脏组织学检测和结果: ISO组心脏表面偏暗,颜色暗紫;对照组心脏表面光滑,颜色红润。HE染色光镜下示:ISO组大鼠心 肌细胞肥 大,部分心肌 细胞有嗜酸变性和(或)坏死,病变呈灶性或弥散性分布,主要位于左心室壁,部分大鼠心肌间质结缔组织增生,增生的结缔组织呈条索状;BH组心肌组织病理损伤明显轻于ISO组;与BH组相比,AL组心肌细胞水肿、肥大程度减轻,细胞形态接近于正常细胞;对照组心肌细胞大小正常,排列整齐,见图1。 2.3各组大鼠心脏指数、PRA、AngⅡ比较各组大鼠心脏质量等指数 比较:对照组、BH组、AL组大鼠心 脏指数、PRA、 AngⅡ较ISO组明显降低(P0.01);与BH组相比,AL组大鼠心脏指数、PRA、AngⅡ明显降低(P0.01),见表2。 2.4各组大鼠MMPs、TIMP及MMPs/TIMP比值各组大鼠MMPs、TIMP及MMPs/TIMP比值比较:对照组、BH组、 AL组大鼠MMPs、MMPs/TIMP较ISO组低 (P0.01);与BH组相比,AL组大鼠MMPs、MMPs/TIMP明显降低 (P 0.01),见表3、图2。 3 肾素抑制剂al对大鼠心肌重构的影响 血液中儿茶酚胺水平的升高,可导致心肌收缩力增强,心率加快,外周血管收缩,在心力衰竭的早期阶段可部分代偿血流动力学的异常,但交感神经张力持续过度增高,可引起一系列的不良反应如:心肌代谢增加致血氧消耗明显增加,心肌β 受体密度下调致心肌收缩力下降,外周血管的收缩致心脏后负荷过重,室壁应力增