投喂不同培养基条件对克氏原螯虾仔虾生长性能的影响.docxVIP

投喂不同培养基条件对克氏原螯虾仔虾生长性能的影响 在“繁、繁、分离”的模式中，培育幼苗非常重要。为了确保苗的健康发展，提高成活率，我们需要良好的生长环境，并且需要补充适当的饲料。研究表明，轮虫具有适口性好的优点，并且含有多种营养物质及微量元素 本实验选用了生物絮团、人工配合饲料和冰冻萼花臂尾轮虫 ( 1 材料和方法 1.1 实验虾的饲养 实验所用克氏原螯虾仔虾由上海海洋大学崇明基地抱卵虾孵化所得。选取由同一亲本（体质量为36.45 g）孵化的270只平均体质量为(0.0179±0.0005) g的克氏原螯虾仔虾进行正式实验。实验所用饲料来自浙江澳华饲料有限公司（配方见表1），冰冻萼花臂尾轮虫由上海鳞港生物科技有限公司提供。 1.2 实验分组与饲养 实验开始前30d，先进行稳定生物絮团的培养。具体方法为在经过高锰酸钾消毒过的养殖桶（直径×高=357mm×420mm）中导入40 L自来水（已曝气24h），每天按照磨碎的商品饲料（表1）和葡萄糖（国药集团化学试剂有限公司）质量比1:2添加营养源，使水体C/N15，从而培养稳定的生物絮团。培养期间持续曝气，曝气量约为66 L/min，溶氧保持在7mg/L以上，pH大于7，温度为26℃。30 d后将成熟稳定的生物絮团加入到生物絮团养殖组各实验桶中，通过加入自来水（已曝气24h）将生物絮团浓度(BFV)调整为10mL/L。 实验共分为3组，分别为生物絮团养殖组（絮团组）、投喂人工配合饲料养殖组（饲料组）和投喂冰冻萼花臂尾轮虫养殖组（轮虫组），每组3个重复，共使用9个养殖桶（直径×高=357mm×420mm），每桶随机放入30只活力充足、附肢完整的克氏原螯虾仔虾，并在桶底放置假水草作为遮蔽物。养殖期间，每天分2次（7:00和19:00）投喂，絮团组按照饲料:葡萄糖（质量比1:2）添加营养源，饲料组投喂商品饲料，轮虫组投喂冰冻轮虫，因仔虾在初期摄食能力弱，所以每次都足量投喂，3个实验组投喂总能相同。饲料组和轮虫组每次投喂前吸除残饵和粪便，每3 d换1次水，换水量约为总水量的1/4，絮团组不换水，只补充因蒸发而损失掉的水分，养殖周期为42 d。 1.3 测量指标和方法 1.3.1 溶解氧、温度和ph 养殖期间，每天上午用哈希多参数水质测量仪测定养殖用水的溶解氧、温度和pH；每3d的中午在各个实验桶中取水样300 mL用于测定水体总氮(TN)和总磷(TP)的浓度，经0.45 μm微孔滤膜过滤后进行亚硝态氮(NO 1.3.2 虾体的体外解剖及酶活性测定 实验期间，每隔6 d清点1次各个实验桶中现有的克氏原螯虾成活数量，并从中随机捞取5只，测定并记录其体质量。 实验结束后，先用干燥的滤纸吸收虾体表面的水分并用电子天平（精准度=0.01 g）称量其体质量，再用游标卡尺测量其体长和头胸甲宽，最后解剖各组仔虾，取出肝胰腺及肌肉组织放入离心管中，-40℃保存，用于后续酶活的测定。统计各组体长体质量等生长指标，各实验组成活率、增重率、特定生长率的计算公式： (%) = (%) =( (%/d) =(ln 式中： 1.3.3 饲料、轮虫水分含量测定 实验结束后，将水体中的生物絮团用尼龙网（200目）进行过滤收集，将其和饲料、轮虫于105℃下烘干至恒重，测得水分含量后，密封保存于-20℃冰箱待测。粗蛋白测定用凯氏定氮法，粗脂肪测定用Folch 1.3.4 ．4消化酶活性测定 测定前称取0.2 g肝胰腺鲜样，加入9倍冷生理盐水，用匀浆器在冰浴中匀浆30 s后，离心15 min（4℃，10000 r/min），小心吸取中层清液用于测定消化酶活性。用南京建成生物工程公司试剂盒测定4种消化酶，分别为α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶。 1.3.5 对非特异性免疫酶活性的测定 测定时分别称取0.2 g肝胰腺以及肌肉组织鲜样，加入9倍冷生理盐水，用匀浆器在冰浴中匀浆30 s后，离心15 min（4℃,10000 r/min），取上层清液测定非特异性免疫酶的活性。用南京建成生物工程公司试剂盒测定6种非特异性免疫酶，分别为酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛。 1.4 数据处理与统计分析 所有实验数据均用平均值±标准误（Mean±SE）表示。利用SPSS 23.0软件和Excel 软件进行数据分析和统计，采用单因素方差分析法(One-Way ANOVA)对实验数据进行方差分析；同时用Duncan氏法进行多重比较，以 2 结果 2.1 各实验组水体化学指标的变化 表2显示的是实验期间各实验组的水体指标。絮团组水体的TN、TP、NO 图1显示的是实验期间各实验组水体化学指标的变化。3个实验组的TN、TP、NO 2.2 成活率和体质量 不同饵料对克氏原螯虾终末体质量、WG、SGR和SR等生长指标