复方守宫散的薄层色谱鉴别.docxVIP

复方守宫散的薄层色谱鉴别 复方守宫散是我院肿瘤科特色制剂，由何首乌（制剂）、三七、生甘参、守宫、梅花和拟药等六味中药组成。具有益虚解毒、消肿止痛的功效。主要用于伴有体肿、虚弱、厌食和疼痛的肿瘤患者。它在我院使用了10多年，并取得了良好的效果。本文对三七、何首乌、没药进行薄层色谱鉴别, 对梅花进行了显微鉴别, 方法可靠, 重现性好。何首乌中大黄素具有凉血解毒、逐瘀通经、抑菌、抗炎、保护肝肾、改善微循环、抗肿瘤等作用, 其功效与制剂的功能主治相近, 故确定大黄素为本方的含量测定指标之一, 本文采用薄层扫描法测定制剂中的大黄素含量。具体方法现介绍如下。 1 药品、药品和仪器 仪器:CAMAG TLC SCANNER Ⅲ型薄层扫描仪、CAMAG NANOMAT4型点样仪、CAMAG TLC PLATE HEATER Ⅲ型加热板:瑞士CAMAG公司;BP211D天平:德国Sartorius;HH-S型水浴锅:巩义市英峪予华仪器厂;SK3200H超声仪:上海超声仪器厂;OLYMPUS CX41显微镜。 药品:大黄素对照品 (批号:110756-200110) 、三七对照药材 (批号:120941-200405) :中国药品生物制品检定所;没药、梅花对照药材:由安徽中医学院生药教研室周建理教授鉴定;复方守宫散 (批号20060804 :安徽中医学院第一附属医院制剂中心。 试剂:所用试剂均为分析纯。 2 方法和结果 2.1 膜层析成像 2.1.1 全处方阴性对照品溶液的制备 取本品1g, 加乙醇50ml, 超声处理1小时, 滤过, 滤液浓缩至2ml, 作为供试品溶液。另取大黄素对照品, 加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。再按处方组成和制备工艺制成除何首乌外的其它全处方阴性对照品, 照供试品溶液制备方法同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法 (《中国药典》2005版一部附录VIB) 试验, 吸取供试品溶液2μl、对照品溶液1μl、阴性对照溶液2μl, 分别点于同一硅胶H薄层板上, 以苯-乙醇 (4∶1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 置紫外光灯 (365nm) 下检视。供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点, 阴性对照溶液在相应位置无斑点。见图1 2.1.2 有关全处方共同作用发挥的试验 取本品2g, 加水饱和的正丁醇20ml, 超声处理两次, 每次30分钟, 离心 (2000r/min) 5分钟, 取上清液, 用正丁醇饱和的水洗涤2次, 每次10ml, 弃去水层, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。另取三七对照药材1g, 同法制成对照药材溶液。再按处方组成和制备工艺制成除三七外的其它全处方阴性对照品, 照供试品溶液制备方法同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法 (《中国药典》2005版一部附录VIB) 试验, 吸取上述3种溶液各2μl, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水 (15∶40∶22∶10) 10℃以下放置的下层溶液为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以10%硫酸乙醇溶液, 在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点, 阴性对照溶液在相应位置无斑点。见图2 2.1.3 阴性对照品溶液 取本品2g, 加乙醚10ml, 充分振摇, 过滤, 取续滤液2ml为供试品溶液。另取没药药材1g, 粉碎, 同法制成对照药材溶液。再按处方组成和制备工艺制成除没药外的其它全处方阴性对照品, 照供试品溶液制备方法同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法 (《中国药典》2005版一部附录VIB) 试验, 吸取上述3种溶液各2μl, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以石油醚 (30～60℃) -乙酸乙酯 (9∶1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以5%香草醛硫酸溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点, 阴性对照品溶液在相应位置无斑点。见图3 2.2 梅花的微妙识别 取本品、梅花对照药材和缺梅花的阴性对照品, 水装片, 置显微镜下观察, 可见花粉粒呈类圆形。见图4 3 重量测定 3.1 减失的重量 取本品1g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇25ml, 称定重量, 加热回流1小时, 放冷, 再称定重量, 用甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过。滤液蒸干, 残渣加8%盐酸溶液10ml, 超声处理2分钟, 再加三氯甲烷10ml, 加热回流1小时, 放冷, 置分液漏斗中, 用少量三氯甲烷洗涤容器, 并入分液漏斗中, 分取三氯甲烷层, 酸液再用三氯甲烷提取3次, 每次10ml, 合并三氯甲烷液, 减压回收溶剂至干, 残渣加甲醇