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思密达对肝衰竭大鼠内毒素血症的预防作用 近年来，肝脏疾病与内毒素血症的关系日益受到关注。大量动物实验及临床研究表明各种肝损伤均可发生内毒素血症,其中急性肝衰竭内毒素血症常见,发病率高达58%～100%。预防肝病内毒素血症的形成是改善肝病患者预后的重要手段。本实验用硫代乙酰胺复制出急性肝功能衰竭大鼠模型,观察胃肠粘膜保护剂思密达对肝功能衰竭大鼠内毒素血症的预防作用。 材料和方法 一、 两组患者治疗前后心功能损害情况 SD雌性大鼠65只(由浙江省医科院实验动物中心提供),体重180～220g,随机分成3组,正常对照组(简称对照组)15只,肝功能衰竭组(简称衰竭组)25只,肝功能衰竭治疗组(简称治疗组)25只。 二、 药物和试剂 思密达由博福-益普生制药有限公司生产,硫代乙酰胺由上海化学试剂站中心化工厂生产,用生理盐水配成30mg/ml。 三、 思密达灌胃 衰竭组:硫代乙酰胺,按300m/k,皮下注射,每天1次,连续2天。治疗组:在肝衰竭造模同时应用思密达灌胃(思密达3g加生理盐水50ml配制),每次灌胃2ml,每天2次。对照组:生理盐水2ml,皮下注射,每天1次,连续2天,生理盐水2ml,灌胃每天2次。三组同时实验,第3天剖腹,剖腹前禁食12小时。 四、 定量测定 用乙醚麻醉大鼠后剖腹,无菌状态下抽取门静脉血0.5ml,作内毒素定量测定(偶氮显色法,鲎试剂由上海市医学化验所提供)。同时取全胃,近段空肠10cm,远段回肠10cm,用生理盐水5ml冲洗,冲洗液按倍数稀释后加入无菌平皿中培养,37℃培养24小时后作细菌菌落计数。 五、 胃肠道病理的观察 先肉眼记录胃肠病理改变,并留取胃肠标本,10%福尔马林固定,石蜡切片,染色镜检。 六、 统计分析 所有数据采用t检验。 结果 二、 心力衰竭组和治疗组治疗组的比较 内毒素水平对照组为29.33±18.50ng/L,衰竭组为105.81±18.82n/L,治疗组为74.20±21.38n/L。衰竭组与对照组、治疗组与衰竭组相比均有非常显著差异(P0.01)。 三、 胃肠菌的培养 见表1 四、 大量液体或气体 肉眼观察,衰竭组大鼠6/16胃肠扩张明显,腔内见大量液体或气体,治疗组4/20胃肠扩张。镜下观察,肝功能衰竭大鼠胃肠粘膜固有层变薄,上皮细胞变性,胃粘膜糜烂3例,治疗组病变较轻,未发现胃糜烂。 保护肠道黏膜,减少内毒素的吸收 正常情况下,肠道存在着大量细菌,可产生内毒素,完整的肠粘膜有屏障功能,能抵御较强的刺激和正常菌群的侵犯,尽管肠内有大量内毒素却几乎不能进入机体。极少量内毒素吸收进入门静脉,再经肝脏解毒及灭活后,至外周血中含量很少。肝病时由于肝脏枯否细胞功能受损和肝内门体侧枝循环形成,肠道内毒素未经枯否细胞的吞噬灭活或直接经分流进入体循环而形成内毒素血症。一旦内毒素血症产生后可加重肝脏损害,有研究表明,内毒素可直接损伤肝细胞,并刺激巨噬细胞释放白细胞介素、肿瘤坏死因子、溶酶体酶,使肝细胞进一步受损。内毒素还可诱发全身代谢,血液动力学改变,参与肝病多种并发症的发生发展,严重影响肝病的预后。如能抑制肠道细菌以减少内毒素的生成,保护胃肠粘膜减少内毒素的吸收可望达到预防内毒素血症形成的作用思密达是一种消化道粘膜保护剂临床常用于腹泻病的治疗,其主要成分为双八面体蒙脱石(一种硅酸铝盐),它对消化道粘膜有很强的覆盖能力,并通过与粘液糖蛋白相互作用,提高粘膜屏障对致病因素的防御功能,它还对消化道细菌、病毒、毒素有极强的固定、抑制作用。因此思密达理论上可预防肝病内毒素血症的形成作用。本研究通过动物实验来进一步观察思密达对肝衰竭内毒素血症的影响,经研究表明,由硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝衰竭模型门静脉内毒素水平明显升高,胃肠道细菌培养提示细菌上移、菌落总数明显高于对照组、胃肠道病理观察可见胃肠扩张,1/3大鼠腔内充满液体和气体,可见胃肠粘膜固有层变薄,上皮细胞变性,部分大鼠胃粘膜糜烂。经思密达治疗后,门静脉内毒素水平有明显下降,与衰竭组相比有非常显著性差异,胃肠细菌培养提示细菌总数有所下降,胃肠病理观察治疗组胃肠扩张,腔内积气、积液相对较轻,未发现粘膜糜烂。因此考虑思密达对肝衰竭内毒素的预防作用可能通过保护胃肠粘膜,结合胃肠道细菌及毒素有关。如果合用微生态制剂,进一步调节肠道菌群,抑制肠道细菌上移,以减少内毒素的产生及移位,可能会加强内毒素血症的预防作用有待进一步研究.