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肝癌肝移植临床标本库的建立与应用 目前，中国许多医疗单位已经建立了一套标准化的肿瘤样本数据库，包括肝肿瘤样本数据库。然而，尚未建立标准化的肝肿瘤标准化研究计划，因此，没有统一的标准化样品采集、处理、存储方法和程序。 2文章标准化收集和保存了肝癌肝移植供者和受者的标本, 其中受者病肝标本包括肝癌组织、癌旁组织、远端非肿瘤组织、外周血提取的血浆和血清或经处理过的临床样本 (DNA、RNA等) , 建立了与肝癌标本相关的临床诊治、术后随访资料、知情同意等伦理资料的信息管理系统, 初步建立了符合国际规范的临床样本库, 为肝癌肝移植领域研究提供了宝贵的临床样本资源。 张庆, 郝昱文, 岳扬, 陈虹, 王乐天, 陈新国, 沈中阳.科研型肝癌肝移植临床标本库的建立及意义[J].中国组织工程研究, 2014, 18 (49) :7985-7989. Accepted:2014-09-03 Zhang Q, Hao YW, Yue Y, Chen H, Wang LT, Chen XG, Shen ZY.Establishment and significance of research-based clinical liver transplantation specimen bank for hepatocellular carcinoma.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu.2014;18 (49) :7985-7989. 0 肝脏肝脏疾病样本库研究现状 肝癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤。肝移植是目前惟一同时治疗肝癌和肝硬化的有效手段。尽管肝移植技术日趋成熟, 但肝癌肝移植后肿瘤复发和转移的机制尚不清楚, 因此, 建立规范化的肝癌肝移植临床样本库为开展相关领域研究提供资源平台尤为重要。然而国内外尚无规范化科研型肝癌肝移植标本库的研究报道。自2009年利用武警总医院作为国内肝移植规模位于前列的医疗优势, 标准化收集和保存了肝癌肝移植供者和受者的标本, 其中受者病肝标本包括肝癌组织、癌旁组织、远端非肿瘤组织、外周血提取的血浆和血清或经处理过的临床样本 (DNA、RNA等) , 建立了与肝癌标本相关的临床诊治、术后随访资料、知情同意等伦理资料的信息管理系统, 初步建立了符合国际规范的临床样本库, 为肝癌肝移植领域研究提供了宝贵的临床样本资源。 1 标本采集和处理 设计:建立肝移植标本临床库。 时间及地点:于2009年8月至2014年4月在肝移植研究所实验室进行。 对象:采集对象均为自2009年8月以来在武警总医院住院等待实施肝移植的肝癌患者及终末期良性肝病患者 (包括乙肝或丙肝合并肝硬化、自身免疫性肝病、酒精性肝硬化、急性肝功能衰竭、肝豆状核变性、布加综合征等) 。全部病例均经临床化验检查及病理学诊断明确。还包括健康供者。 标本库由病理技术员专人负责, 熟悉收集流程并熟练掌握标本处理操作规范及质量控制的方法。标本库的建立已由医院伦理委员会批准通过。 主要设备:-86℃超低温冰箱 (海尔DW-86L626型, 配套有放置冻存管的金属盒架:每个冰箱有4层, 每层分格有5列盒架, 共20个冻存管盒架, 每个冻存盒可容纳冻存管100个, 分为横10行竖10列) 、-40℃冰箱 (海尔DW-40L262型) 、普通冰箱 (海尔BCD-205TJ型) 、6升的液氮罐 (YDS-6, 四川东亚液氮罐厂) 、全自动脱水机 (樱花SAKURA公司) 、石蜡包埋机 (樱花SAKURA公司) 、石蜡切片机 (LAICA RM2235) 、冰冻切片机 (LAICA 1590) 、净化工作台 (ZYJ-S型) 、医用离心机 (TL-80-1型) 、L500低速自动平衡离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公司) 、BX60显微镜、UVmini-1240紫外分光光度仪及联想电脑等。 主要试剂:血液、组织DNA提取试剂盒 (德国QIAgen试剂盒) 、淋巴细胞分离液 (上海恒信化学试剂有限公司产品) 、无水乙醇 (北京化工厂) 、RNAase (美国Omega公司) 等。 方法: 标本收集前的准备:肝移植术前征得患者及其家属知情同意, 签署知情同意书。 收集前的准备:由科室住院总医生负责确定标本收集的研究对象及通知采集时间。组织标本由专门负责标本库的病理技术员进行采集, 并负责提前准备标记好的冻存管、留取血清和血浆的医用采血管、转移式液氮罐、不锈钢标尺、体积分数10%甲醛溶液、照相机、标本资料表等工作。组织标本采集工作在手术室进行, 采集器械由手术室提供。标本收集、处理与贮存的方法参照国外文献报道。 标本的规范化收集、处理与贮存: 新鲜冻存标本收集、处理及保存:当肝癌肝移植受者的完整病肝组织切除离体后, 立即用相机拍摄大体标本外观 (包括标尺, 显示