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温度胁迫对薄皮甜瓜果实内源多胺的影响 杏仁是一种喜热植物。低温季节的栽培会导致水果发育不良和品质下降。尤其是冬季温室的栽培，主要是在亚适温环境中，导致生长缓慢和品质不良。因此，对制定低温和耐寒性工厂的节能技术具有重要意义。 许多研究表明,多胺是众多植物逆境生理反应的重要指标之一,温度胁迫会引起植物体内各种多胺之间的转变和含量改变(茅林春和张上隆,1999;杜永臣 等,2003;Ireáne et al., 2004;Yeun et al., 2005)。同时,多胺也是鉴别许多作物品种耐低温性的重要指标之一(Wang,1987;周玉萍 等,2003)。以往的研究多是探讨低温胁迫后正常温度条件下植物体内多胺的变化(林定波 等,1994),或是低温胁迫下耐低温与不耐低温品种植株体内多胺含量的变化比较(韦军和田边贤二,1994;Lee et al., 1997;Wenyun et al., 2000),而有关不同温度下植物体内多胺的变化及其与果实发育之间关系的研究目前尚鲜见报道。 因此,本研究中以薄皮甜瓜‘玉美人’为试材,研究不同夜间温度对果实膨大、多胺含量的影响,探讨果实内源多胺对温度胁迫的响应及其与果实膨大之间的关系。 1 材料和方法 1.1 夜温处理试验 试验于2007年2—6月在沈阳农业大学工厂化高效农业工程技术研究中心科研基地日光温室内进行。供试薄皮甜瓜(Cucumis meloL.)品种为‘玉美人’。2007年2月5日播种,穴盘育苗,4月4日定植于25 cm×25 cm的塑料桶中,定量浇水,单干整枝,12～14节位留瓜,一株留一个瓜,21节位去生长点。开花后7 d移入人工气候室进行夜温处理。 夜温处理分别为18 ℃、15 ℃、12 ℃和9 ℃,处理时间为18:00—次日6:00,白天均升为26 ℃。相对湿度和光照条件各处理相同。相对湿度60%;光照6:00—10:00(475±50)μmol·m-2·s-1,10:00—16:00(1 045±50)μmol·m-2·s-1,16:00—18:00 (570±50) μmol·m-2·s-1,18:00—次日6:00无光照;共处理18 d。 每处理25株,单株取样为1次重复,共3次重复。 1.2 高效液相色谱法 分别在夜温处理的0、3、6、9、12、15、18 d的上午8:30取大小基本一致的4个甜瓜果实,称量平均单果质量;测量各个果实的横、纵径;同时从3个果实中分别取果肉1 g,液氮速冻,-80 ℃低温冰箱保存,备用于果实内源多胺含量的测定。 多胺提取参照Flores和Galston(1982)的方法。称取果肉1 g,用4 mL预冷的5%(体积分数)高氯酸(HClO4)在冰浴中研磨成匀浆,冰浴浸提1 h后,低温下(0 ℃)23 000 g离心20 min,收集上清液。取上清液0.5 mL加入1 mL 2.0 mol·L-1的NaOH,10 μL苯甲酰氯,旋涡振荡20 s后,37 ℃下保温30 min,然后加入2.0 mL饱和NaCl,2.0 mL乙醚,旋涡振荡20 s后,1 500×g离心5 min,收集1.0 mL醚相于小离心管中,用真空浓缩冻干系统蒸干(型号MAXI dry Lyo),-20 ℃低温冰箱保存用于多胺含量的测定。 多胺含量的测定采用高效液相色谱法(HPLC)(刘俊 等,2002)。腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)标样均购自Sigma 公司。高效液相色谱仪为Waters600E,紫外检测器,波长230 nm,色谱柱为反相C18(5 μm,5.0 mm×250 mm),柱温30 ℃,流动相为甲醇 ∶水=60 ∶40(体积分数),流速为0.7 mL·min-1。待测样品用300 μL 60%(体积分数)甲醇溶解,用微孔滤膜(孔径0.45 μm)过滤后上机测定,进样量为20 μL,外标法定量计算,通过标样计算样品中多胺的浓度,计算单位质量鲜样中多胺的含量,单位是nmol·g-1FW。 2 结果与分析 2.1 薄皮甜瓜果实品质 从图1可以看出,不同夜温处理对薄皮甜瓜果实生长有明显影响。从单果质量看,在薄皮甜瓜开花后7 d开始处理至处理18 d时,各处理单果质量均快速增长,其中夜温12 ℃处理前6 d的单果质量低于15 ℃处理,其后二者无明显差异;18 ℃处理在处理6 d后明显小于12 ℃和15 ℃处理;9 ℃处理增长最慢。从这一结果看,薄皮甜瓜单果质量增长的最佳夜温为12～15 ℃,夜温18 ℃和9 ℃不利于单果质量增长。 从果实的膨大过程看,虽与单果质量有相似变化趋势,但处理开始后的6 d内果实横、纵径增长快,而后逐渐缓慢。 从单果质量增长率看,其变化趋势更说明薄皮甜瓜在处理后6 d内单果质量增长率高,而后进入缓慢期,处理间主要在前期差异较大,