源库调节对抗虫棉铃氮代谢的影响.docxVIP

源库调节对抗虫棉铃氮代谢的影响

自1997年中国大规模推广应用抗虫棉bt基因转移以来，以抗虫棉转移为主的区域一直在扩大。据统计,目前中国种植的转Bt基因抗虫棉面积已占植棉面积的70%以上。转基因抗虫棉的迅速发展,主要是由于其能有效地减轻棉铃虫等相关害虫的危害,减少农药用量。这样既节省了植棉用工和成本,又减轻了农药对环境的污染,具有良好的经济效益和生态效益。

国内外报道认为转Bt基因棉花抗虫性存在时空分布,棉铃中杀虫蛋白质含量显著低于叶片,且转Bt基因棉的常规种虽有较强的结铃性,但铃小铃轻。即转Bt基因棉棉铃存在抗虫性低和棉铃发育受限的问题。这2个问题都与棉铃发育的氮代谢生理密切相关,因此在探讨转Bt基因棉的源库关系对棉铃发育和Bt蛋白质表达量影响的基础上,进一步研究其对棉铃氮代谢的影响,为协调转Bt基因棉花的棉铃发育与抗虫性高效表达提供科学依据。

1材料和方法

1.1试验材料及处理方案

试验于2009年和2010年在扬州大学农学院试验农场进行。2009年进行剪叶减源试验,以转Bt基因抗虫棉泗抗1号(小铃型)和科棉3号(大铃型)为试验材料。按单因素随机区组设计,重复3次,小区面积35m2,8行区,小区密度1hm227000株,管理措施按高产要求进行。剪叶处理从开花开始,一直至棉铃吐絮。沿叶片主脉剪去全株每张叶片的1/2,但保留主脉。每小区处理3行,共48株。以不剪叶为对照。2010年进行去蕾减库试验,供试品种与2009年相同。从开花开始,每隔一果节均匀去除1/2整株蕾数的棉蕾,每隔3d去除1次,直至吐絮期。每小区处理3行,共48株。以不去蕾为对照。

1.2棉铃测定

2009和2010年都于7月20日挂牌标记各处理当日花,分别于花后7d、14d、21d、28d每小区取10个棉铃测定体积和铃重(铃重为去除铃壳后的子棉烘干重)。

1.3棉铃抗氧化活性测定

对方法1.2中标记的各处理当日花,分别于花后7d、14d、21d、28d每小区取5个棉铃,取样后立即用液氮冷冻,用于氮代谢有关指标的测定。棉铃丙酮酸转氨酶(GPT)活性、棉铃草酰乙酸转氨酶(GOT)活性的测定应用2,4-二硝基苯肼比色法;棉铃游离氨基酸和可溶性蛋白质含量的测定分别采用茚三酮比色法和考马斯亮蓝比色法;全氮含量的测定采用硫酸-双氧水比色法。

2结果

2.1花后12d不同品种对铃重的影响

表1表明,与对照相比,剪叶后泗抗1号和科棉3号的铃重在开花后14d均显著减少,特别是大铃品种科棉3号,花后7d已有显著差异。花后28d,小铃品种泗抗1号比对照减少7.5%,大铃品种科棉3号减少20.5%。可见,剪去整株一半叶使铃重显著下降,尤其大铃品种受影响更大。

去蕾处理使开花后14d的铃重显著增加。至开花后28d,小铃品种泗抗1号比对照增加5.8%,大铃品种科棉3号比对照增加10.4%。减库增源使铃重显著增加,尤其大铃品种受影响更大。

2.2修剪和去花蕾，调节棉铃体积增加期间氮代谢的影响

2.2.1不同增源处理对大铃全氮含量的影响

表2表明,与对照相比,剪叶后棉铃全氮含量增加,特别是大铃品种,花后7d就显著增加。剪叶对小铃品种泗抗1号棉铃全氮含量的增加效应以花后14d最大,大铃品种科棉3号以花后21d最大。大铃品种剪叶后全氮增加的幅度大于小铃品种,例如花后28d,小铃品种剪叶处理比对照增加2.3%,大铃品种比对照增加9.14%。可见减源使体积增大期棉铃全氮含量增加,尤其大铃品种受影响更大。去蕾处理使体积增大期棉铃全氮含量显著降低。与对照相比,花后14～28d,去蕾处理的全氮含量降低率大铃品种大于小铃品种。例如开花后28d,小铃品种泗抗1号比对照减少9.7%,大铃品种科棉3号减少15.7%。减库增源使棉铃全氮含量减少,尤其大铃品种受影响更大。

同一栏中不同小写字母表示差异达到0.05显著水平。

同一栏中不同小写字母表示差异达到0.05显著水平。

2.2.2不同品种的铃氨基酸含量的增加量

表3表明,与对照相比,剪叶后棉铃氨基酸含量增加,特别是小铃品种,花后7d已显著增加。大铃品种至花后14d才显著增加。但开花21d后,小铃品种泗抗1号剪叶处理棉铃氨基酸含量的增加量明显低于大铃品种。例如花后28d,小铃品种剪叶处理比对照增加19.7%,大铃品种剪叶处理比对照增加21.7%。减源使体积增大期棉铃氨基酸含量增加,尤其以大铃品种增加较多。去蕾使体积增大期棉铃氨基酸含量在开花14d及以后受到显著影响,棉铃氨基酸含量下降。与对照相比,大铃品种处理后棉铃氨基酸含量下降的幅度更大。开花后28d,小铃品种泗抗1号去蕾处理比对照减少10.5%,大铃品种科棉3号去蕾处理比对照减少33.8%。增加叶源使棉铃氨基酸含量减少,尤其大铃