3.1重组DNA技术的基本工具第1课时课件-高二下学期生物人教版选择性必修3(1).pptx

重组DNA技术的基本工具第三章基因工程

【学习目标】1.理解基因工程的概念2.运用结构与功能观，说明基因工程的各种工具的作用及特点3.比较限制酶、DNA连接酶的差异，区分DNA连接酶和DNA聚合酶4.关注基因工程的社会议题【重难点】重点：重组DNA技术所需的三种基本工具的作用难点：基因工程载体需要具备的条件

转基因番木瓜番木瓜番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒思考：科学家是如何培育出能抵御病毒的番木瓜的呢？

基因工程概述1.基因工程的概念：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术转基因超级鼠正常小鼠

思考1.基因重组技术只能用于同种生物之间吗？2.若能用于不同种生物之间，为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？不是①基因是控制生物性状的独立遗传单位②遗传信息的传递都遵循中心法则③生物界共用一套遗传密码

思考3.DNA分子水平的操作科学家是如何实现的呢？用到了那些工具？“分子运输车”“分子手术刀”“分子缝合针”

限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1.定义：切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶2.来源：原核细胞中分离3.种类：数千种4.作用：识别并切断DNA链中特定部位的磷酸二酯键4~8个核苷酸组成专一性

DNA双螺旋结构图限制酶：切断磷酸二酯键

切割结果1.EcoRI限制酶切割——黏性末端识别序列：GAATTC切割位置：G和A之间的磷酸二酯键黏性末端EcoRI（在G与A之间切割）

切割结果2.SmaⅠ限制酶切割——平末端识别序列：CCCGGG切割位置：G和C之间的磷酸二酯键平末端SmaⅠ（在G与C之间切割）

思考讨论…TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…5′3′5′3′…AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…5′3′5′3′问题：找到上面两条片段上EcoRⅠ的识别序列和切割位点

拓展——限制酶的命名例如：从大肠杆菌（Escherichiacoli）的R型菌株中分离来的EcoRIEcoRI属名首字母种名前两个字母R型菌株从中分离的第一个限制酶

DNA连接酶——“分子缝合针”1.定义：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子所用到的酶2.作用：恢复双链DNA中被限制酶切开的磷酸二酯键DNA连接酶

DNA连接酶——“分子缝合针”3.种类类型E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体作用只连接黏性末端连接黏性末端和平末端实质连接双链DNA中被限制酶切开的磷酸二酯键

DNA连接酶——“分子缝合针”切开DNA双链形成的粘性末端切开DNA双链形成的平末端形成磷酸二酯键恢复双链E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶形成磷酸二酯键恢复双链

注意1.T4DNA连接酶既可以连接黏性末端又可以连接平末端（效率相对较低）2.E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端3.DNA连接酶不具有特异性识别功能

名称作用部位作用结果限制酶DNA连接酶DNA聚合酶DNA(水解)酶解旋酶对比常用的几种酶磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对之间的氢键将DNA切成两个片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸将双链DNA分子局部解旋为单链

基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1.功能：将目的基因转入受体细胞，在受体细胞内对目的基因进行大量复制2.种类：质粒、噬菌体、动植物病毒质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子

基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”3.载体需要具备的条件一个至多个限制酶切割位点能够在受体细胞中复制并表达具有特殊的标记基因对受体细胞无害常用标记基因：四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因用于筛选重组DNA分子

“分子运输车”“分子手术刀”“分子缝合针”结合所学知识前文提到的“分子运输车”、“分子手术刀”、“分子缝合针”分别代表哪种工具？

标记基因的筛选原理：载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力扩展延伸导入质粒的受体细胞有抵抗抗生素的能力存活，未导入的受体细胞死亡

关于转基因生物你还知道哪些？关于转基因农作物还存在很多争议，请结