HPLC技术在药物分析中的应用.docxVIP

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摘要

高效液相色谱法具有测量速度快、灵敏度高、回收率好等多项优点,已经在多个领域得到广泛应用,色谱技术是药品分离、分析检测的有效手段,比较常用的是高效液相色谱技术,高效液相色谱法(简称HPLC)是在气相色谱理论的基础上发展起来的,该法在高压下测量,色谱柱压降明显,测量速度快,可达到0.1-10.0mL/min;灵敏度高,耗样量少,分离效果好等多项优点,为实现对药品的快速、高效、高灵敏度的分离测定奠定了基础[1]。本文将围绕高效液相色谱法在药物分析中的应用进行分析。

关键词:药物分析;高效液相色谱法;应用;

目录

TOC\o1-3\h\z\u第一章 现代分析技术简介 3

第二章 高效液相色谱介绍 3

第三章高效液相色谱在药物分析用的应用 4

3.1HPLC在天然药物分析中的应用 5

3.2抗生素分析 5

3.3在含量测定中的应用 6

3.4手性药物分析 6

3.5临床药物检测 7

第四章高效液相色谱法在药物分析中的发展 7

4.1联用技术 7

4.2微柱高效液相色谱法 8

第五章结论与展望 9

参考文献 9

致谢 11

现代分析技术简介

高效液相色谱法(英文简称HPLC)是目前我国药物分析应用最为广泛的分析方法,适用于分离分析热不稳定性、离子、极性及高分子化合物,其实质为层析以流体为流动相柱,其测定过程为使用高压泵促使溶剂瓶中液体(即流动相)流入检测器、色谱柱及样器后排出其废液,确保样品再由样器进入随着流动相再次进入色谱柱。同时,样品中各被测组分于色谱柱中依次柱填料类型不同则以不同色谱原理为参照,例如:凝胶排阻、离子对、离子交换、分配原理及吸附作用等,出现相应的差速迁移实现色谱柱分离,再由流动相先后带出柱,经检测器转变为电信号,输入记录器中记录形成色谱峰。

目前我国药物分析中医超高效液相色谱法及反相液相色谱法为最为常用的高效液相色谱法。相较于传统HPLC,超高效液相色谱法(英文简称UPLC)分离原理与其相似,并且由HPLC速率理论范式方程可得出色谱分离度随着色谱柱填料颗粒粒径下降而上升。一旦填料颗粒粒径下降至1.7μm是理论板高度最小值区域不断被扩大,说明流量范围越宽则所获取的柱效越高,而UPLC主要通过改变色谱柱填料颗粒粒径改善其柱效,确保其以不损失高分离度为前提条件优化其流速,进一步提高其分析速度。此外,选择UPLC法测定咖啡酸、丹酚酸B及迷迭香酸等化学成分时优势较为明显,例如:可重复性及便捷准确等。

反向高效液相色谱(英文简称RP-HPLC)与正相高效液相色谱以流动相及固定相的相对极性为主要区别,而RP-HPLC固定相属于非极性,流动相属于相对极性,例如:以四氢呋喃、丙酮、乙腈、甲醇及水为典型代表的水互溶性有机溶剂等,能不断调节保留时间。由此可见,RP-HPLC是一种兼顾稳定性、灵敏度及选择性的新型分离分析技术手段,适用于药物定性定量分析。伴随柱填料技术快速发展,RP-HPLC分析应用范围不断扩大,被广泛应用于易解离样品及无机样品分析领域。为了控制样品分离过程中解离速度,普遍使用缓冲液控制流动相中pH值。值得注意的是,pH值过高存在造成硅胶溶解的可能性。

高效液相色谱介绍

色谱是现代化学常用的分析、分离技术。最早发展起来的是气相色谱技术,气相色谱技术主要利用物质的挥发性进行检测。但是,已知的化合物中有70%是非挥发性物质,因此气相色谱技术的应用具有一定的局限性。高效液相色谱相对于气相色谱来说,具有分离分析速度快、适用性更广泛等特点,对大多数的沸点高、分子较大、热稳定性能差的化合物来说,高效液相色谱分析比较实用且分析效果好,目前以成为药品分析检测非常重要的方法。

普通高效液相色谱分析技术虽然适用性强、效率高,但是也存在着缺陷,由于液相色谱的填料相对单一,分离只能针对某种物质来进行,很难通过简单的一次实验将所有待检测物质全部进行分离分析检测,这也是今后如何对普通的高效液相色谱分析进行改进的地方。

高效液相色谱法(highperformanceliquidchro-matography,HPLC)高效液相色谱是在经典液相色谱法的基础上发展起来的一种在线分离分析方法,用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高,选择性好和应用范围广等优点。它结合了液相色谱法和气相色谱法的分析分离原理,并且可以直接用于分析难挥发、热不稳定及高分子样品,弥补了气相色谱法的弱点,扩大了色谱法的应用范围。由于HPLC方法的诸多优点,使得该方法称为中国药典所有分析方法中发展最快的一种分

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