免疫标记的应用与评价课件.pptVIP

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免疫標記的應用與評價;免疫標記的應用;CD34+的分析:

未動員前外周血中CD34+細胞1~4%,CD34+/CD38-細胞1/2500,CD34+/CD38-/CD90+細胞1/10000。

各家單抗不同、操作不一,結果難以比較。

內毒素、單純化療(骨髓抑制)、細胞因數、化療聯合細胞因數等的動員。;;???T細胞標記

T細胞及其亞群T祖細胞(pro-T)的表型為CD34+、TdT+、CD10+、CD7+、未成熟T細胞標誌CD3、CD4和CD8。在T細胞發育過程中,CD7是最早出現的T細胞標誌,且貫穿表達在整個T細胞分化發育過程中。胸腺細胞要分化發育為有功能的成熟T細胞,細胞表面標誌需經歷一定的變化過程。;從CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-→CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-(即CD4、CD8雙陰性)→CD7+、CD1+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+(即CD4、CD8雙陽性),最後發育成CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8-、TCR+和CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8+、TCR+單陽性的兩群成熟胸腺細胞,然後進入外周淋巴器官和血液,執行免疫功能。;但在正常外周血中通常存在CD3+、CD4+、CD8-(TH/TI),CD3+、CD4-、CD8+(TS/TC),CD3+CD4+CD8+和CD3+CD4-CD8-四種表型不同的T細胞,它們分別占T細胞總數的60%~70%,20%~30%,1%~3%,1%~10%。前三種表型細胞的TCR主要為TCRαβ,而CD4-CD8-T細胞主要表達TCRγδ,他們都執行細胞免疫功能。

;CD2是綿羊紅細胞受體和淋巴細胞功能相關抗原-2(LFA-2),表達於人95%T細胞、50%~70%胸腺細胞和大顆粒淋巴細胞(LGL/NK)的表面。CD3是T細胞表面抗原,表達於成熟胸腺細胞、靜息和啟動的的外周血T細胞,是鑒定T細胞的重要標誌,其胞漿和膜CD3是早期和普通型T細胞白血病的主要分型標記。;CD5、CD7是T細胞白血病較特異的標記,也是髓系白血病時最常見的伴隨標記。CD15、CD45則是白細胞的共同標記抗體,在淋巴瘤的診斷中有一定的價值。而CD25和CD28主要分佈於活化T淋巴細胞表面,為活化T淋巴細胞標誌。胸腺細胞、靜止T細胞、靜止B細胞以及NK細胞表面無表達。主要用於淋巴細胞疾病的免疫分型。外周血淋巴細胞CD25+、CD28+占54%~86%;末端去氧核苷酸轉移酶(TdT)和II類人類白細胞抗原(HLA-DR)的陽性表達對早期T細胞白血病的診斷有重要價值。TCRα、β、γ的基因重排檢測有利於惡性T細胞疾病細胞異常克隆存在的確定。

另外,80%~90%和95%以上的NK細胞表達CD16和CD56。用CD3-CD16+CD56+可定義NK細胞。;B細胞標記;(3)未成熟(早期)B細胞(immatureBcell):CD9、CD10消失,出現SIgM、CD22。CD20、CD24、CD40、CD72、CD74、CDw78、CD79表達增加。其他新的B抗原CD37、CD2、CDw75、CDw76相繼出現。

(4)成熟B細胞(matureBcell):SIgM和IgD同時表達,並出現CR、FcR和絲裂原受體,上述B細胞抗原繼續存在。

;(5)活化B細胞(activatedBcell):成熟B細胞被抗原或絲裂原刺激後,成為活化B細胞,繼之增生和分化。在此過程伴隨表達B細胞啟動抗原CD23、CD77、CD80、CD86和其他啟動相關抗原如CD25、CD26、CD30、CD69、CD70、CD71、CD38等。膜結合型Ig逐漸減少,分泌型Ig逐漸增加,並可發現Ig基因重鏈類型轉換。

(6)漿細胞(plasmacell):啟動B細胞進一步分化成為產生抗體的漿細胞,這時獲得PC-1、PCA-1和CD138漿細胞特異抗原,CD85表達增加,CD38抗原再出現。而SIg和上述B抗原消失。CD79仍可存在於胞質中。

;B細胞上的CD抗原分為:①B細胞限制性(特異性)抗原:CD19、CD20、CD21、CD22、CD77和CD79,它們的表達只限於B細胞上,在鑒別細胞系上是十分重要的標誌。②B細胞相關性抗原:CD5、CD9、CD10、CD23、CD24、CD37、CD40、CD53、CD72、CD73、CD74、CDw75、CDw76、CDw78、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD86

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