流动相中加SDS测定rhIL-2（Ⅰ）纯度.pdfVIP

·668 · 壹量堑 ：QffljPharmaceuticalAffairs2010Vo1．29，No．I1 流动相中加 SDS测定 rhIL一2(I)纯度 祝 晓风 ，马金 龙 、 (山东泉港药业有限公司，山东 济南 250014) 摘要 ：目的 建立在流动相中加十二烷基硫酸钠(SDS)测定 rhIL一2(I)纯度的分析方法，用于rhIL一2(I)的质量控制。 方法 Protein—Pak色谱柱，流动相为0．1mol·L一’磷酸盐一0．1mol·L 氯化钠缓冲液 。pH7．0(舍 0．02 SDS)，检测波长 为 280nm。结果 理论板数为2810，精密度 RSD为 1．13 。结论 本方法精密度高 ，重复性和耐用性好，可用 rhIL一2(I) 的质量控制。 关键词 ：重组人 白介素一2(1)；纯度 ；流动相 ；十二烷基硫酸钠 中图分类号 ：R927．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—7738(2010)11—0668—02 DeterminepurityofrhIL一2(I)byaddingSDSinmobilephase ZHU Xiao—feng．MA Jin—long (ShandongQuangangPharmaceuticalCo．，Ltd．，Jinan250014) ABSTRACT：OBJECTIVE ToestablishanmethodfordeterminationOfrhlL一2(I)byaddingSDSinmobilephasefor qualitycontro1ofrhIL一2(I)．METHODS A Protein～PakCO】umnwasused．Themobilephasewas0．11／101．L～ phosphate 一 0．imo1 ·L_。sodium chloride buffer solution with pH7．0 (adding 0．02 SDS)．The detection wavelength was 280rim．RESULTS Thetheoreticalplatesnumberwas2810，theRSD was1．13 。CoNCLUSION Themethodhashighdegree ofprecision，finereproducibnitiesandgooddurability，whichcanbeappliedforqualitycontro1ofrhIL一2(I)． KEYWORDS：RhiL一2(I)；Purity；Mobilephase；SDS 重组人 白介素一2(I)是由带有高效表达人 白介索一2 改善 ，但是柱效很低，当SDS浓度在 0．02 ～O．05 之间的 (I)基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株，经发酵、破菌、粗 图谱基本一致，由于高浓度的SDS会损伤色谱柱，缩短柱子 提、复性、高度纯化后制成的原液 ，其基因序列是将 rhlL一2 的寿命，即确定了流动相中加入 SDS的合适浓度为 0．02 。 的 125位编码半胱氨酸的序列突变为编码丝氨酸的序列[”。 3．2系统适应性实验 取供试品重组人 白介素一2(I)原液(批 本实验是用 HPLC法检验其纯度时在流动相中加入适量十 号：201O04601)进样 ，得到的图谱见图 1。人 自介素一2色谱峰的 二烷基硫酸钠 (SDS)做表面活性剂 ，结果使柱效大大提高 ， 保留时间为 14．72min，与杂质峰的分离度为 16．0，柱效为 2810 而且峰形对称性 、系统适用性 、重复性都比较好 。 大于药典规定的1500，说明本系统条件满足实验要求。 1 仪器与试药 Waters600E型液相色谱仪 ，TL一9000色谱数据处理 系统，C)【一Ⅳ型柱温箱 ，色谱柱型号：Protein—PakSteelI-- 125。磷酸、磷酸二氢钠 、氯化钠 ，均为优级纯，天津市科密欧 化学试剂有限公司，