瘦素对体外三维培养大鼠关节软骨细胞的作用及对软骨修复相关基因IGF-Ⅰ表达的影响.pdfVIP

阿北医药2011年9月 第33卷 第 17期 HebeiMedicalJournal，2011，Vol33SepNo．17 2573 doi：10．3969／j．issn．1002—7386．2011．17．003 · 论 著 · 瘦素对体外三维培养大 鼠关节软骨细胞的作用及对 软骨修复相关基 因IGF—I表达的影响 王舒新 李勇 【摘要】 目的 研究瘦素对体外三维培养大鼠关节软骨细胞的活性、增殖及功能的影响，并探讨其对 软骨修复基因IGF—I的影响。方法 将体外培养扩增的大鼠软骨细胞与海藻酸钙结合，制成软骨细 海 藻酸钙复合物。诱导培养液中添加不同浓度瘦素 ，24h后 MTT检测法检测细胞活性。RealtimePCR定量 研究IGF-1mRNA表达，分析评价软骨细胞分泌的功能。结果 通过对提取的细胞形态学观察及染色证 实为软骨细胞在不同浓度瘦素诱导下，三维培养的大鼠软骨细胞增殖活性及修复基 因IGF—I与A组(空白 组)对比均有上调(P0．05)，同时瘦素浓度为 10ng／ml时上调幅度 明显高于其他组(P0．o1)。结论 在三维培养下，低浓度瘦素更有利于大鼠软骨细胞生长。瘦素结合三维培养能有效维持大鼠关节软骨 细胞的表型，并促进细胞 IGF-I合成分泌。 【关键词】 瘦素；软骨细胞；藻酸钙；IGF—I；Ⅱ型胶原 【中图分类号】 R681．3 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002—7386(2011)17—2573—03 Theeffects ofleptin on the articular cartilage cells cultured by three-dimension mode and on the expressionofIGF-Iinratsinvitro WANGShuxin，LIy0 ，DepartmentofGeneralSurgery，TheSecond HospitalofTanshanCity，Hebei，Tangshan063000，China A【bstract】 Objective Toinvestigatetheeffectsofleptinontheactivity，proliferationandfunctionof articularchondrocytesculturedbythree·d·imensionmodeandontheexpressionofinsulin--likegrowthfactor-·I (IGF．I)inratsinvitro．Methods Thecartilagecellsofratsamplifiedinvitrowerecombinedwithcalcium alginateto make cartilage cells／calcium alginatecomplex，which were cultured in culturemedium by adding differentconcentrationsofleptin．After24hours，Mrrrwasusedtodetectthecellactivity，andReal—timePCR was usedtoanalyzethemRNAexpressionofIGF．IinordertoevaluatethesecretionfunctionofthecartilagecellS． Results TheresultsshowedthattheproliferationactivityandthelevelsofIGF-·1weresignificantlyup--regulated inthe cartilage cellscultured bythree—dimension mode and induced by differentconcentrations ofleptin，as comparedwiththoseinrgoupA (blankgroup，P 0．05)，furthermore，whentheconcentrationofleptinwas lOng／ml，theup—regulatingamplitudewassignificantlyhigherthanthatintheothergroups(P 0．01)． Conclusion Duringthree—dimens