放射免疫检测技术面临的现状与前景.pdfVIP

当代 I苤学 2010年 1月第l6卷第3期总第 194期 ContemporaryMedicine，Jan．2010，Vo1．16No．3IssueNo．194 放射免疫检测技术面临的现状与前景 郑柳 1959年 由YalowfNBerson首先用于糖尿病患者血浆胰岛素 (CPBA)开创。第二代(1965～l970年)众多学者对RIA技术进 含量 的测定，从而开创 了放射免疫分析(radioimmunoassay， 行了大量实验研究 ，将RIA和CPBA技术推进到了临床实用水 RIA)。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破 ，开辟 平。l968年建立了利用核素标记的抗体检测抗原的放射分析法 了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测 (IRMA)。第三代(1971～l980年)RIA技术广泛的用于小分子化 定的极微量而又具有重要生物学意义的物质得 以精确定量 ，从 合物的检测。第四代(1981～1995年)小鼠抗绵羊红细胞的单克 而为进一步揭开生命奥秘打开了一条新的道路 ，使人们有可能 隆抗体(McAb)的出现为RIA提供了新型特异性抗体，使得放射 在分子水平 重新认识某些生命现象的生化生理基础。 免疫技术灵敏度、特异性提高。 但是随着方法标记免疫分析技术的不断进步，各种免疫分 2 放射免疫技术的最新进展 析技术如化学发光免疫，时间分辨荧光免疫分析等的各项非同 第五代RIA技术 ，是 目前正在研发并使用的，它是以磁性 位素标记技术的出现和完善 ，有些检测项 目将取代RIA。RIA 微粒子与RIA或IRMA$N结合为特点的。磁性微粒子直径小、 的现状及未来如何发展成 我们所关注的热点。 表面连有活性基团等特性，使其在包被均一性、反应活性等方 1 放射免疫检测技术的历史 面都要优于经典的分析方法。 放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确 2．1 双标记液SHIRMA技术 性和抗原抗体反应的特异l生相结合的体外测定超微量(10-10 g)物 它是五代RIA技术 中最具推广意义的。主要特征是将两 质的新技术。广义来说，凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体， 株高特异性单克隆抗体(McAb)分别标记 I和异硫氰酸荧光素 通过免疫反应测定的技术，都可称为放射免疫技术，经典的放射免 (FITC)共同作为标记试剂，待测样品在液相 中生成双标记夹心 疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有限量的抗体，然后通过测定标 免疫复合物，以抗FITC磁性微粒子固相作为分离剂。 记抗原抗体复合物中放射眭强度的改变，测定出未标记抗原量。它可 实验结果 表明：(1)双标记液SNIRMA比普通的IRMA节省 以分为两类：竞争I~RIA(adioimmunoassay)和非竞争lfliRIA，也称为 了时间。(2)对于中小化合物，双标记液相IRMA法的灵敏度明 免疫放射分析。 显高于酶免疫法和化学发光法。(3)检测量程宽，特异性强，适 1968年Miles和Hales建立了利用核素标记的抗体检测抗原 宜大量样本检测。 的放射分析法，为了与放射免疫分析区别 ，故称免疫放射分析 2．2 磁性微粒子二抗分离法和磁性微粒子固相一抗法 技术(immunoradiometricassay，IRMA)。 其原理都是以磁性微粒子代替了原来的PR分离剂，免疫反应 据李振 甲…等人的总结，RIA技术从开创至今，按照技术的 和分离时间都有不同程度的缩短。两种方法分析结果存在一定的 进步大可划分为五代。 系统误差，由于两种方法本身的差异以及检测时不可避免的环境