四逆汤对hepa16肝癌细胞的抑瘤作用和细胞周期影响的体内外实验研究.pdfVIP

·1143· 四逆汤对hepal一6肝癌细胞的抑瘤作用和 细胞周期影响的体内外实验研究 陈嘉璐 李滂健 江苏省苏州市中医医院肿瘤科 215003 摘要目的：研究四逆汤对肝癌细胞的体内外抗癌作用；从细胞周期角度揭示温阳法抗癌的作用机制；为采用温阳法治疗肝癌 提供理论与实验依据，为肝癌的防治开辟新的研究领域。方法：运用细胞培养技术，MIT法，整体小鼠移植瘤实验等从整体及细 胞水平评价四逆汤对肝癌细胞增殖的抑制作用。并采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化，从细胞周期角度观察四逆汤对肝 癌细胞周期的影响。结果：①四逆汤对肝癌细胞有显著的抑制作用，具有浓度依赖性。②四逆汤对免疫器官具有保护作用，脾脏 指数与胸腺指数明显上升，与化疗组相比有显著差异(P0．05)，四逆汤与化疗联合，脾脏指数与胸腺指数明显上升，与单纯化 疗组比较有显著差异(P0．05)。③四逆汤可以通过G0／G1期阻滞诱导细胞凋亡，与化疗联合出现s期阻滞。 关键词温阳法四逆汤肝癌细胞周期 以肝细胞癌(HCC)为主的原发性肝癌是世界第六者，阴气也，其始发有常处，其痛不离其部，上下有所终 大常见恶性肿瘤，世界各地肝癌发病率均有上升趋势。 始，左右有所穷处。”¨3强调了肝癌的形成与阳虚寒凝 由于乙型肝炎病毒的传播等原因导致我国肝癌高发的 关系密切。本实验以温阳的代表方四逆汤为研究对 趋势十分严峻，约占全球肝癌病例的55％，同时也是我 象，对扶正法治疗肝癌进行初步，系统的实验观察研 国第二位的肿瘤死亡原因，在全球占第三位，严重威胁 究，以此探讨中医温阳法在肝癌治疗中的作用和机制， 我国人民的健康和生命…。 为临床应用提供理论依据，并可为临床在辨证基础上 HCC病因涉及多因素、多步骤、多基因、多突变汪J。 的合理选择有效方药提供临床基础。 实验证明：几乎所有的癌基因，抑癌基因的功能效应， 最终都会聚到细胞周期上来，许多癌基因、抑癌基因直 实验材料 接参与细胞周期的调控，或者本身就是细胞周期的调 I细胞株 控机制的主要成分。∞5肝癌组织中也发现多种细胞周 Hepal-6肝癌细胞株，由苏大生命科学院提供。 期调节因子的异常。将作用于不同细胞周期时相的药 物联合使用，是肿瘤联合治疗的基础。但是当前的化 苏尚生物科技有限公司提供(许可证号SCXK(沪) 疗模式存在明显副作用和剂量限制性毒性，肿瘤细胞 2007一0005)。 对化疗药物存在天然耐药和获得性耐药，使用细胞毒 2实验用药 性抗癌药物化学疗法治疗晚期恶性肿瘤，其生存益处 2．1注射用顺铂(冻干型)(齐鲁制药有限公司批 微小。H1因此，恶性肿瘤的多学科综合治疗中，中医药 疗法已成为治疗恶性肿瘤的重要方法之一。 液中，0．22urn的微孔滤器除菌。 中医学从整体观出发，认为恶性肿瘤的发生、发 2．2 四逆汤 由制附子、干姜、炙甘草组成。本方来 展，主要是由于正气虚损、阴阳失衡、脏腑功能失调，留 源于张仲景的《伤寒论》为回阳救逆的代表方剂，剂量 滞客邪(致病因子)，致使气滞血瘀、痰凝毒聚、相互胶 根据原方结合现代临床常用剂量调整：制附子lOg，干 结、蕴郁成肿瘤。肝癌晚期，常常出现脾肾阳虚，不能 姜69，炙甘草69。所有药物来自春晖堂中药饮片厂，附 温煦推动血行，出现虚寒证候。肝阴血不足易引起阳 子(产地四川，批号090615)，干姜(产地四川，批号 亢，久则阴损及阳，肝功能衰减，而导致肝阳虚，阳虚生 外寒而出现一系列虚寒证候p1。《难经·五十五》；“积 以上中药提取物，生药浓度为lg／rn|，由苏州中医医院 of of tionofA549ceil