miR-214对胃癌细胞GC7901侵袭迁移能力的影响.pdfVIP

中华医学会病理学分会第十七次学术会议暨首届中国病理年会论文汇编 会议交流 背景胃癌是常见的恶性肿瘤，尽管胃癌的诊断 测转染miR-214 和治疗取得了一些进展，但是胃癌患者的预后仍 细胞侵袭迁移能力变化。 不令人满意，浸润和转移是其预后不良的主要原 结果1． 因。微小RNA(microRNAs，miRNAs)是目前肿 miR-214的靶基因之一，并且miR-2145’一种子 mRNA 瘤研究中最受关注的生物大分子之一。研究发现 序列区和PTEN 3’一UTR保守序列有连续的 miRNA在肿瘤的转移与浸润当中起了重要的作碱基互补，结合后形成的miRNA：mRNA二聚体有 用，它们可以通过抑制靶基因的表达参与到细胞 一定的稳定性。2． 转染24h后，在荧光显微镜 外基质降解、上皮间质转化(EMT)及肿瘤血管下观察计数，miR-214 生成过程中，影响肿瘤的浸润转移。胃癌浸润转 转染人胃癌SGC7901细胞，转染效率达80％以上。 3． 移相关的miRNAs研究比较少，日本学者对353转染24h后，Real-timePCR检测不同转染 例临床胃癌进行了miRNAs表达谱分析，发现 miR-214高表达是胃癌浸润深度、侵袭、淋巴结 转移及分期的独立危险因素。我们前期研究中也 量分别是control组的82902．31倍，0．16倍。 发现胃癌细胞株BGC823、Ml(N45和SGC7901中4．Western blot结果：SGC7901细胞转染 miR-214 miR-214的表达水平比正常胃黏膜细胞株GES-1mimics后，PTEN蛋白相对表达水平 增高。关于miR一214的靶基因及作用机制也有研 究：Li等发现，在炎症反应中，miR-214通过 与PTENmRNA的3’一非翻译区结合抑制其转录 翻译，使人单核巨噬细胞株THP-I凋亡延迟。 (O．099±0．012)降低，差异具有统计学意义(P Jindra等发现，在T细胞活化中，miR-214表达 0．05)。5．Transwell侵袭小室实验结果： 升高，并且与PTEN的表达水平呈负相关。有研转染miR-214mimics组侵袭细胞数为43．60± 究也发现，miR-214在卵巢癌中可以抑制PTEN 4．39，明显高于无关序列组(25．80±7．79)， 的转录后翻译，激活P13K／AKT信号通路，抑制转染miR一214 肿瘤细胞凋亡和诱导顺铂耐药。但是miR-214空白转染组(24．60±6．54)，差异有统计学意 是否确实为浸润转移的相关因素，尚需大量实验 义(PO．001)。而转染miR一214inhibitors 研究证实，其作用机制也有待深入研究。 组侵袭细胞数与无关序列组，空白转染组相比 目的探讨miR-214对胃癌细胞株SGC7901侵袭较，差异无统计学意义(P0．05)。 迁移能力的影响及其可能作用机制。 方法1． 应用miRanda靶基因预测网站和mimics组穿膜细胞数为39．oo±6．04，明显高于 TarBase数据库分析PTEN是否为miR-214靶基 因，并确定PTENmRNA与miR-214可能结合位点。 2． mimics， 分别瞬时转染miR-214 (20．40±4．77)，差异有统计学意义(PO．05)。 inhibitors和无关序列到SGC7901细胞株，以 而转染miR-214inhibitors组穿膜细胞数与无 无关序列转染组(NC组)为阴性对照，以空白关序列组，空