脱细胞脑组织基质修复支架体外形态学和细胞相容性观察.pdfVIP

中文摘要 脱细胞脑组织基质修复支架体外形态学和细胞相容性观察 专 业 神经外科 硕士研究生 龚瑾 导 师 郭英 主任医师 摘 要 目的：观察采用脱细胞技术初步研制出来的脱细胞脑组织基质修复支架的形态结构， 及其与神经干细胞共培养时细胞的生长情况，为研制出理想的脑组织损伤修复支架提供初 步的实验依据。 方法：①脱细胞脑组织基质修复支架制备：运用反复冻融、蛋白酶和髓tonX．100脱 细胞，碳环氧化物交联等方法处理成年sD大鼠皮层脑组织，初步制成脱细胞脑组织基质 修复支架。②修复支架材料的形态学观察：分别通过光学显微镜和扫描电镜观察修复支架 材料表面的三维立体构型和内部结构特征。③免疫组化分析正常脑组织和修复支架材料内 细胞外基质成分：通过免疫组化的方法对比正常脑组织和脱细胞修复支架材料中三种重要 培养：取指数生长期的SD大鼠脑源性神经干细胞，通过荧光染料DAPI标记后与修复支 架材料体外共同培养，倒置相差荧光显微镜和扫描电镜观察神经千细胞生长、增殖、分化 以及与修复支架材料的粘附情况。 结果：①成年SD大鼠新鲜脑组织经脱细胞处理后，细胞成分已大部分去除，形态上 具有高度仿生的三维立体孔洞结构，孔洞形态相似，孔径大小相近，约90pm左右，亲水 性良好。经碳环氧化物交联过后，修复支架材料的生物稳定性增强，置于PBS包装液中长 期低温保存，未出现降解。②免疫组化结果显示，三种细胞外基质在正常脑组织中含量相 对偏少，且分布与文献报道相符，但在修复支架材料中未检测出来。③修复支架材料与神 经干细胞体外共培养时，细胞可粘附于材料表面，但粘附力较弱，细胞生长良好，且未出 现分化现象。 中文摘要 结论：1．初步研制的脱细胞脑组织基质修复支架具备了神经修复支架材料的基本物理 学条件； 2．初步研制的脱细胞脑组织基质修复支架体外与神经干细胞相容性良好，但与细胞的 粘附力有待增强； 3．在脱细胞脑组织基质修复支架材料研制过程中，如何保留细胞外基质的主要成分， 有待进一步优化； 关键词： 脱细胞支架材料神经干细胞细胞外基质去抗原 H 英文摘要 observationsonthe and an morphology acellularcerebralmatrix in scaf-foldVitr0 repair M吗甜： Ne戮’os诩翟ery Postgl_ndnme：gongJm SHpen，isor：prI吐guoying Abstl?act observethe matrix objec咖e：T0 m‘印holo斟of柚acellul盯Ca曲ralrepairsca勖ld，趾d its tlle on ofmeneural a impaCt grownl st锄cells，m饥to proVideprelilIlinary 嘶dence1．0r