2010年执业药师考试辅导《药物分析》(冲刺班)讲义0501.docVIP

第五章　分光光度法第一节　紫外-可见分光光度法 　　·紫外-可见吸收光谱的波长范围　　波长200～400nm为紫外光区，400～760nm为可见光区。　　紫外-可见吸收光谱的产生　　光是具有能量的，价电子吸收能量由低能量的基态转变为高能量的激发态。价电子跃迁需要的能量等于一定波长光具有的能量，此种物质会吸收这个波长的光。不同结构的物质分子能级差不同，能吸收不同波长的光，可以产生不同的紫外-可见吸收光谱。　　·光的吸收定律　　分子对特定波长光的吸收程度除了与分子的结构有关外，还与被测物质溶液的浓度有关。单色光穿过吸光物质溶液时，在一定的浓度范围内，被该物质吸收的光量与该物质溶液的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比。——朗伯比尔定律。　　　　A为吸光度，T为透光率，E为吸收系数，C为被测物质溶液的浓度，L为液层厚度。　　·吸收系数　　吸光物质在单位浓度，单位液层厚度时的吸收度。E↑，A ↑，灵敏度↑　　吸收系数E是物质的物理常数（同种物质具有相同的E），随浓度C单位的不同，吸收系数E有不同的意义和表示方法。　　ε，一定波长下，C = 1mol/L , L = 1cm时A；　　E1%1cm，C＝ 1%（W/V），L ＝1cm，A　　ε与的关系：　　　　·紫外－可见分光光度计　　基本结构： 光源、单色器、吸收池、检测器、讯号处理、显示器。　　光源：氘灯（紫外光）、钨灯（可见光）　　单色器：分离出测定波长的光。包括：进口狭缝、准直镜、色散元件（棱镜和光栅）、聚焦透镜和出口狭缝　　吸收池：玻璃（只能用于可见光区），石英（可用于紫外区，也可用于可见区）　　检测器：光电池、光电管或光电倍增管　　仪器的校正　　校正内容：波长、吸光度的准确度、杂散光　　·吸光度的测定要求　　1.溶剂：　　＊ 能充分溶解样品　　＊ 与样品无相互作用　　＊ 挥发性小　　＊ 在测定波长下吸光度符合要求　　2.空白试验　　扣除测定的影响因素，用参比溶液调吸光度为0，再测定样品吸光度。　　3.测定波长的检查　　吸光度的测定一般在最大吸收波长（λmax）处，以提高测定灵敏度，减小测定误差　　4.供试品溶液的浓度　　使吸光度在0.3～0.7　　5.仪器狭缝宽度的选择　　以减少狭缝宽度时，供试品溶液的吸光度不再增加为准。　　·定性与定量方法　　1.定性鉴别　　依据：相同的化合物有相同的光谱　　对比吸收光谱特征数据：最大吸收波长（λmax）、吸收系数（）、吸光度（A）　　对比吸收度（或吸收系数）比值：吸收峰较多，比较几个波长处的吸光度比值　　　　　　　　　　　　　　　　　Al1/Al2→El1/El2　　对比吸收光谱的一致性：完全相同→可能是同一种化合物　　　　　　　　　　　　　明显差别→肯定不是同一种化合物　　2.纯度检查　　杂质检查：有吸收的杂质——使化合物的吸收光谱变形。　　化合物紫外可见区没有明显吸收，所含杂质有较强吸收——少量杂质就可用光谱检索出来。　　化合物较强吸收峰：杂质无吸收峰，很弱——稀释效应，E（ε）↓ 杂质更强吸收峰——E（ε）↑　　杂质限量检测：规定波长下，一定浓度的样品吸光度是否符合要求　　3.含量测定　　（1）单组分的定量方法：A＝ECL　A～C 线性 ， A→C　　吸收系数法A＝ECL C＝A/EL　　对照法：标准溶液，样品溶液，选定波长　　A标＝EC标L A标/A样＝EC标L/ EC样L A标/A样＝C标/ C样　　A样＝EC样L 　　　　　　　　　　　　C样＝C标A样/A标　　同种物质，同台仪器，同一波长测，故 E、L相等　　中国药典（1990年版）规定维生素B12注射液规格为0.1mg/ml，含量测定如下：精密量取本品7.5ml，置25ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，置1cm石英池中，以蒸馏水为空白，在361±1nm波长处吸收度为0.593，按E1%1cm为207计算，维生素B12按标示量计算的百分含量为：　　A.90%　　B.92.5%　　C.95.5%　　D.97.5%　　E.99.5% 　　[答疑编号181050101] 　　『正确答案』C 　　对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数（E1%1cm）为715计算，即得。若样品称样量为m（g），测得的吸收度为A，则含量百分率在计算公式为：　　A.A/715×250/5×1/m×100%　　B.A/715×100/