鼻咽癌组织中细胞自发凋亡与凋亡相关基因突变型P53、Bcl-2表达的关系.pdfVIP

实用临床医学 2008年第 9卷第 10期 PracticalClinicalMedicine，2008，Vol9，No10 · 21 · 鼻咽癌组织中细胞 自发凋亡与凋亡相关基因 突变型 P53、Bcl-2表达的关系 钟晓鸣 ，张 力 ，邬 蒙 (1．江西省肿瘤医院放疗科 ，南昌330029；2．九江市第一人 民医院肿瘤科 ，江西 九江 332000) 摘要 ：目的 探讨鼻咽癌组织中细胞 自发凋亡与凋亡相关基因突变型P53、Bcl一2表达之间的关系。方法 对 38 例初治、无远处转移、放疗前鼻咽癌患者活检标本采用原位DNA末端标记 (TUNEL)法检测细胞 自发凋亡，免疫组 化二步法检测突变型P53和Bcl一2基因的表达情况。结果 鼻咽癌组织中突变型P53与Bcb2基因表达水平呈正 相关 (r一0．426，PO．05)，鼻咽癌组织 中突变型 P53、Bcb2基因表达水平与细胞 自发凋亡率均呈负相关 (r分别一 一 0．658、一0．756，P均d0．05)。结论 突变型 P53与 Bel一2基 因的表达在调节鼻咽癌细胞 自发凋亡 的过程 中可 能存在协 同作用 。 关键词 ：鼻咽癌；细胞自发凋亡；突变型P53；Bcb2 中图分类号 ：R739．62 文献标识码 ：A 文章编号：1009--8194(2008)10--0021--03 鼻咽癌是我 国最为常见的头颈部恶性肿瘤。放 进行。 射治疗是 目前鼻咽癌唯一有效 的根治性治疗手段 ， TUNEL法检测 38例鼻咽癌组织 中细胞 自发 而肿瘤放射敏感性是肿瘤放射治疗成败的关键。如 凋亡。操作按试剂盒 (美国PRoMEGA公司)说 明 何预测及提高肿瘤细胞的放射敏感性，一直是放射 书进行。不加脱氧核糖核酸酶反应混合物滴加PBS 肿瘤学家和放射生物学家关注的问题。本研究通过 替代作为阴性对照，经脱氧核糖核酸酶反应混合物 对 38例初治、无远处转移 、放疗前鼻咽癌患者标本 (100FL)室温消化 20min后染色作为 阳性对照 。 采用原位 DNA末端标记 (TUNEL)法检测细胞 自 BX41双 目光学显微镜 (日本 OLYMPUS医用设备 发凋亡，免疫组化二步法检测突变型 P53和 Bcl一2 有限公司)下随机选择 10个高倍镜 (×400)视野 ，每 基因的表达 ，探讨鼻咽癌组织 中细胞 自发凋亡与凋 个视野计数 100个细胞 ，按公式计算细胞 自发凋亡 亡相关基 因突变型 P53和 Bcl一2的表达之间的关 率 ，即凋亡指数。凋亡指数 (AI)一 (阳性细胞数／总 系，为今后可能通过调节凋亡相关基因的表达、增强 细胞数)×100 。 肿瘤细胞发生凋亡的能力 ，达到提高放射敏感性提 1．3 统计学方法 供参考 。 运用 SPSS12．0统计软件对数据进行统计分 析 ，采用 Spearman秩相关及检验 。 l 材料和方法 2 结果 1．1 材料 收集 2004年 3月～2005年 2月本 院病理科 38 鼻咽癌组织中突变型P53与Bcl一2基因的表达 例初治、无远处转移 、放疗前 的鼻咽癌患者活检标 水平呈正相关 (r一0．426，P0．05)，见图 1。 本，男26例，女 12例 ；年龄 17～71岁，平均 48岁。 均为低分化鳞癌。临床分期 ：Ⅱ期 1例 ，Ⅲ期 26 例 ，IV期 1l例 。 1．2 方法 免疫组化二步法检测 38例鼻咽癌组织中突变 型 P53、Bcl一2的表达。用福州迈新生物技术有限公 司所提供 的已知 P53、Bcl-2阳性切片作为 阳性对 照，磷酸盐缓冲液 (PBS)代替一抗作为阴性对照 。