高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响及易位的时间效应.docxVIP

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2017-09-21 发布于江苏
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高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响及易位的时间效应.docx

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四川大学硕士学位论文钟共５个时间点，其余各组作用１５分钟后，ＧＬＵＴ４免疫荧光染色，激光共聚焦显微镜观察各组系膜细胞ＧＬＵＴ４分布，测定其荧光强度同时用ＲＴ—ＰＣＲ检测ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ表达．结果：１．正常肾小球系膜细胞可观察到ＧＬＵＴ４表达。２．胰岛素增加ＧＬＵＴ４的表达，高糖组ＧＬＵＴ４表达明显下降。３．胰岛素可引起系膜细胞ＧＬＵＴ４易位。４．低浓度胰岛素组、高浓度胰岛素组细胞ＧＬＵＴ４均在加入胰岛素１５分钟后达到最大易位，且以后的４５分钟胞膜上的ＧＬＵＴ４的荧光强度与１５分钟时无差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论：１．正常肾小球系膜细胞有ＧＬＵＴ４表达，胰岛素可刺激系膜细胞ＧＬＵＴ４易位。２．高糖明显抑制ＧＬＵＴ４在系膜细胞上的表达。３．胰岛素可部分拮抗高糖导致的ＧＬＵＴ４下调，且呈剂量依赖性。４．不同浓度的胰岛素诱导ＧＬＵＴ４易位的时间过程是相似的，均在加入胰岛素后１５分钟达到最大易位且一直维持到后来测定的４５分钟。５．ＧＬＵＴ４在糖尿病肾病的发生发展机制中起重要作用。关键词：糖尿病肾病：葡萄糖转运蛋白４易位：胰岛素：高糖血症２婴型奎兰堡主兰垒堡茎ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｉｎｓｕｌｉｎｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｈｅｔｉｍｅｃｏｕｒｓｅｏｆｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｏｆｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓａｎｇｉａｌｃｅｌｌｓＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ：ＬＡＩＸｕｅ一１ｉＴｕｔｏｒ：ＰｒｏｆＨＵＡＮＧＳｏｎｇ—ｍｉｎＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ（ＤＭ）ｉｓａｄｉｓｅａｓｅｗｈｉｃｈｍｅａｎｓａｇｒｅａｔｈａｚａｒｄｔｏｐｅｏｐｌｅ’ｓｈｅａｌｔｈ．Ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ（ＤＮ）ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｈａｚａｒｄｏｕｓｃｈｒｏｎｉｃｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆＤＭ，Ｉｔｉｓｐｒｏｖｅｄｔｈａｔｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｓａｋｅｙｆｅａｔｕｒｅｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ａｎｄｔｈｅｉｍｐａｉｒｅｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔａｓｐｅｃｔｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｉｎｓｕｌｉ＇ｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｓｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ４（ＧＬＵＴ４）ｆｒｏｍａｎｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｐｏｏｌｔｏｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｔｈｒｏｕｇｈｔｗｏｓｉｇａｌｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇＰ１３ＫａｎｄＣＡＰ／Ｃｂｌｔｏｒｅｇｕｌａｔｅｇｌｕｃｏｓｅｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ．ＴｈｅａｉｍｏｆｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｅｘａｍｉｎｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｉｎｓｕｌｉｎＯｆｆｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ａｎｄｔｈｅｔｉｍｅｃｏｕｒｓｅｏｆｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓａｎｇｉａｌｃｅｌｌｓ（６ＭＣｓ）ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｔｈｅｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＤＮａｎｄｓｅｅｋａｎｅｗｐａｔｈｆｏｒｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｃｕｒｅｏｆＤＮ．西Ⅲ大学硕士学位论文Ｍｅｔｈｏｄ：Ｃｕｌｔｕｒｅｄ１０９７ｒａｔＧＭＣｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ８ｇｒｏｕｐｓ：．①ｃｏｎｔｒｏｌ，②１０～ｏｌ／Ｌｉｎｓｕｌｉｎ，③１０１ｍｏｌ／Ｌｉｎｓｕｌｉｎ，④１０１ｍｏｌ／Ｌｉｎｓｕｌｉｎ，⑤ｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅ，⑥ｍａｎｎｉｔｏｌ，⑦ｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｐｌｕｓ１０１ｍｏｌ／Ｌｉｎｓｕｌｉｎ，⑧ｈｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｐｌｕｓ１０‘ｍｏｌ几ｉｎｓｕｌｉｎ．６ＬＯＴ４向州Ａｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ—ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ—ＰＣＲ）．ＣｏｎｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｅｖｅｒｙｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｔｉｍｅｃｏｕｒｓｅｏｆＧＬＵＴ４ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｉｎＧｒｏｕｐ＠）、③、④．Ｒｅｓｕｌｔｓ：１．ＧＬＵＴ４ｃｏｕｌｄｂｅｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｎｏｒｍａｌＧＭＣ．２．ＩｎｓｕｌｉｎｅｎｈａｎｃｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４．ＨｉｇｈｇｌｕｃｏｓｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ．３．ＩｎｓｕｌｉｎｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＧＬＵ