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有机酸工艺学实践教学综合性实验项目设计与实践 　　摘 要：《有机酸工艺学》是一门综合性很强的专业课。该文将比较教学法用于教学实习内容的设计，每个实验小组选择不同的离子种类及浓度，使组内和组间比较金属离子浓度和种类对柠檬酸生成、菌体生长的影响，并筛选高产酸能力的实验菌株。对于加深同学们对理论知识的理解、提高《有机酸工艺学》教学实习的效果具有重要意义。 　　关键词：有机酸工艺学；教学实习；比较教学法 　　中图分类号 G642.0 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）14-175-03 　　《有机酸工艺学》教学改革概述 　　《有机酸工艺学》是一门实践性极强、与生产实际联系非常紧密的专业课，其主要研究有机酸发酵的原理、原料、菌种、工艺、技术以及与之相关的各种新工艺、新方法，对于培养学生掌握利用微生物发酵生产有机酸的科学原理、实验技能、科学研究及实际动手能力非常重要。本门课程是我院生物工程专业的一门必修课，也是比较有特色的一门课程，目前仅有浙江工商大学、仲恺农学院和宁夏大学等少数几所院校开设了本门或相关的课程。 　　由于开设本门课程及相关课程的院校较少，目前仅有宁夏大学对该课程的教学改革进行了研究。宁夏大学高度重视实践性教学在《有机酸发酵工艺学》课程中的应用，提出通过将实践性教学贯穿于课堂教学、开设综合性和设计性实验、对本科生开放专业实验室、引进仿真软件、建立校外实践教学基地等手段来提高本门课程的教学效果。研究结果表明，此举大大调动了学生参与实践的积极性、主动性和学习兴趣，有效激发了学生独立思考、灵活运用和勇于创新的能力，提高了学生的综合素质和实践技能，有助于将学生培养成应用型、创新型及开拓型人才[1]。 　　虽然目前对本门课程进行教学改革研究的报导较少，但是对类似课程进行教学改革已有较多报导。山东师范大学对《食品发酵工艺学》的教学改革和实践进行了研究，提出了在理论教学中以发酵产品的共性规律为主线，并在实验教学中开设相应综合大实验的教学模式；并设置了学生主讲日，鼓励学生参与创新实验来提高本门课程的教学效果[2]。东北农业大学对《果酒加工工艺学》的教学方法及教学手段进行了改革，发现通过改进教学方法、增设综合性实验可显著提高本门课程的教学效果和学生的学习兴趣[3]。 　　由上述研究可知，教学改革可显著提高应用性课程的教学效果，而实践教学是教学改革的重中之重，设计合理的综合性项目可极大的激发学生的学习热情。《有机酸工艺学》重点讲授的是柠檬酸的发酵生产，因此设计1个柠檬酸发酵的综合性实验，对于加深同学们对相关理论和实践知识的理解有重要意义。 　　多种微生物，包括细菌[4]、真菌[5]和酵母[6]都能利用不同的底物来发酵产生柠檬酸，但是黑曲霉（Aspergillus niger）由于其产酸率高、易于处理、能够利用多种底物等特点，是目前工业生产上唯一使用的柠檬酸产生菌[7]。液态发酵工艺是最常用的柠檬酸发酵工艺，底物的性质对柠檬酸的产率有重要影响，目前最常用的底物为甜菜糖蜜和甘蔗糖蜜。菌丝体的流变学特性对发酵液的物理性质及柠檬酸产率有重要影响，而菌丝体的流变学特性与生物量的浓度息息相关[8]。除了上述因素外，柠檬酸的产率还受到诸多因素的影响，其中培养基金属离子的种类和含量对柠檬酸合成的影响最大。Zn2+、Mn2+、Fe2+、Cu2+等金属离子在极低浓度下即会显著抑制柠檬酸的生成[7]；金属离子之间还存在相互作用，在接种时加入0.1～500mg/kg的Cu2+可拮抗Fe2+对柠檬酸合成的不利影响[9]。氮源种类对柠檬酸的合成也有重要影响，铵盐如尿素、氯化铵、硫酸铵等有利于柠檬酸的合成[10]。另外，搅拌速度[11]、发酵温度[12]对柠檬酸合成也有重要影响。 　　柠檬酸的分离提取方法有多种，包括钙盐沉淀法、溶剂提取法、大孔树脂吸附法和原位提取法，其中钙盐提取法最为常用[7]。柠檬酸的定性分析方法有多种，除了色谱分析法外，根据国家标准GB/T8296-2006《柠檬酸》，柠檬酸可以采用物理和化学的方法进行定性分析[13]。 　　根据上述国内外的最新研究进展，结合本院实验室的实际情况，本院现有的《有机酸工艺学》教学实习方案采用黑曲霉作为柠檬酸产生菌，主要研究Mn2+浓度（共设置4个浓度）对柠檬酸合成、耗糖速率及生物量的影响，采用钙盐法对柠檬酸进行分析纯化，并根据国标的方法对所得结晶进行定性分析。近几年来的实践结果表明，所选用的Mn2+浓度对菌体生长和柠檬酸的积累具有显著影响，实验效果较为明显。该综合项目显著的促进了同学们对发酵工艺原理的理解、培养了同学们发酵行业基本实验技能，尤其是最后的数据处理和讨论环节加深了同学们对《生物化学》、《发酵工艺原理》、《生物分离工程》、《微生物学》等课程的理解和理论知识的综合运用