松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长抑制作用.docVIP

松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长抑制作用 　　[摘要]　目的　探讨松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用。　方法　按标准方法给小鼠接种S180肉瘤细胞，随机分组，分别灌胃给予1　000、500、250　mg/kg松茸乙醇提取物，10　d后观察肿瘤抑制率、免疫器官质量分数、体重的变化及HE染色肿瘤组织结构。结果　不同剂量松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的抑制率分别为41.82%、36.36%、8.48%；脾脏质量分数、胸腺质量分数与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义（均P　　0.05）。　结论　松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的生长有抑制作用。 　　[关键词]　松茸；S180肉瘤；肿瘤抑制 　　[中图分类号]　R730.51 [文献标识码]　A [文章编号]　1673-7210（2012）12（b）-0032-03松茸（Tricholoma　matsutake）亦称松蕈、合菌、松蘑（朝鲜族）、松口蘑等，是担子菌纲伞菌目口蘑科（Tricholomataceae）口蘑属（Tricholoma）的一种与松树共生外生菌根真菌。在我国东北地区的吉林省以及西南地区的云南、四川、西藏都有分布。松茸菌肉肥厚，香气宜人，味道鲜美，具有较高的营养价值和药用价值，曾被誉为“食用菌之王”[1-3]。松茸具有很高的药用价值及多种生物活性。据文献报道，松茸具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗真菌、抗糖尿病、抗炎等功效[4]，在27种担子菌抗肿瘤食用菌中，其抗肿瘤活性居第2位[5]。 　　松茸作为一种具有显著抗肿瘤活性的食用菌，具有广阔的开发前景，据文献报道松茸中具有抗肿瘤活性的成分主要是多糖类化合物[5-7]，课题组对松茸抗肿瘤活性部位进行研究的过程中，发现醇提部位MTX也能抑制肿瘤细胞的增殖，同样具有较强的抗肿瘤活性，其活性成分及作用机制值得深入研究。 　　1　材料与方法 　　1.1材料 　　小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞由武汉大学基础医学院提供；环磷酰胺粉针（200　mg/支，批号，由江苏恒瑞医药股份有限公司生产；昆明种小鼠，雄性，体重18～22　g，购自武汉大学动物中心，合格证号：4200592711。 　　1.2　方法[8-9] 　　1.2.1松茸乙醇提取物的制备 取松茸约5　kg，适当粉碎，分次置5　000　mL圆底烧瓶中，用10倍量95%乙醇回流提取3次，每次分别为3、2、2　h，纱布过滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩，得松茸乙醇提取物浸膏约100.82　g。 　　1.2.2　小鼠移植瘤模型的建立 将S180小鼠腹水型肿瘤细胞株接种于腹腔，于7　d后脱颈椎处死，用75％乙醇浸泡消毒，无菌抽取腹水瘤细胞，调整细胞浓度为1.3×107/mL，将0.2　mL细胞悬液无菌皮下接种于昆明种小鼠左后肢，观察小鼠生长情况，在接种后第6天全部出现瘤块，小鼠移植瘤模型建立成功。 　　1.2.3　实验动物分组及给药 将小鼠随机分为5组，每组10只，即肿瘤模型组、阳性对照组及松茸乙醇提取物大、中、小剂量组。肿瘤模型组按剂量10　ｍL/kg灌胃给予0.5％CMC，阳性对照组按剂量50　mg/kg灌胃给予环磷酰胺，松茸乙醇提取物大、中、小剂量组以1　000、500、250　mg/kg的剂量灌胃给予松茸乙醇提取物；每日1次，连续10　d，实验过程中让小鼠自由进食和饮水，第11天停药。 　　1.3　观察指标 　　将小鼠称取体重后脱颈处死，分离肿瘤块、脾脏和胸腺组织，称取肿瘤重量，分别计算各组小鼠体重变化平均值、脾脏及胸腺质量分数、肿瘤生长抑制率。肿瘤生长抑制率=（模型组平均瘤重－给药组平均瘤重）/模型组平均瘤重×100％。各组肿瘤组织标本按照常规方法固定，包埋和切片，HE染色进行观察。 　　1.4　统计学方法 　　采用SPSS　12.0统计软件进行统计学分析。计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，两组间比较采用t检验。以P　＜　0.05为差异有统计学意义。 　　2　结果 　　2.1　实验动物的生长情况 　　昆明小鼠接种S180后，从生长情况来看，肿瘤模型组小鼠精神状态较差，进食量显著减少，行动呆滞，皮毛无光泽。而阳性对照组及松茸乙醇提取物给药组的小鼠，其进食量及运动状态均好于肿瘤模型组，皮毛顺滑。给药前后各组小鼠体重变化见表1。由表1可见松茸乙醇提取物大、中、小剂量组及阳性对照组小鼠体重与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义（均P　　0.05）。 　　2.2　对免疫器官质量的影响 　　实验对动物脾脏质量分数和胸腺质量分数的影响结果见表2。由表2可知，阳性对照组与肿瘤模型组比较，差异有统计学意义（P　　0.05）。 　　2.3对小鼠S180肉瘤的生长抑制作用 　　松茸乙醇提取物大、中剂量