枯草芽孢杆菌和绿色木霉对落叶及草坪碎屑腐解影响.docVIP

枯草芽孢杆菌和绿色木霉对落叶及草坪碎屑腐解影响 　　摘要：落叶及草坪碎屑是园林生态系统中最常见的有机固体废弃物，通过腐解可转化成优质有机物料供园林绿化使用。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、绿色木霉（Trichoderma viride）是堆肥腐解常用的有益菌群，在促进腐殖化进程方面有着不同的效果。采用室内培养法，通过接种2类菌株悬液，揭示其在60 d培养期间对落叶及草坪碎屑混料腐解的动态差异。结果表明：绿色木霉在矿化混料总有机碳方面的能力要强于枯草芽孢杆菌；混料经绿色木霉腐解后，其P2O5含量可获得较大程度提升，相反，枯草芽孢杆菌对于混料N及K2O含量的促进作用更为明显；绿色木霉对于混料可提取腐殖酸碳含量（CHE）的利用程度较差，但对胡敏素碳含量（CHu）的矿化能力更强；2类微生物皆有利于混料腐殖质品质的提升，其中枯草芽孢杆菌的作用更为明显。本研究结果可为阐明落叶及草坪碎屑的腐解特征及筛选高效微生物菌群提供技术参考。 　　关键词：落叶；草坪碎屑；腐解；枯草芽孢杆菌；绿色木霉 　　中图分类号： S182文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）23-0258-04 　　毕延刚等指出，在堆肥进程接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）可使堆料对枯萎病病原菌产生抑制作用[4]，此外，（Bacillus subtilis）也可加速物料的腐解进程，且对其中的生物毒性物?|有降解作用[5]。李瑜等研究表明，由绿色木霉（Trichoderma viride）产生的纤维素酶活性较高，当其与枯草芽孢杆菌组成复合菌剂时，通过两者间比例的调整可有效缩短堆肥周期[6]。有学者利用微生物预处理手段，基于菌剂与混料基质间的不同比例（1 ∶19、1 ∶9、1 ∶4），将虫拟蜡菌（Ceriporiopsis subvermispora）接种于园林混料基质中，并在 30 d 培养时间内探讨混料木质素、纤维素、半纤维素及干物质的降解程度，并指出在此过程有甲烷气体产生[7-8]。Awasthi等研究了由黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）、绿色木霉（T. viride）、绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）所组成的混合菌剂在园林、农业及城市固体废弃物与木屑所组成混合物料中的堆肥效果，结果表明，在堆肥过程中，物料淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶及脱氢酶等活性均有所提升，且堆肥过程可缩减至4周以内[9]。可见，配伍适宜的混合微生物菌剂对堆肥品质的提升有所帮助。 　　Bacillus subtilis和Trichoderma viride对于堆肥过程具有较好的促进作用且功能不同。当前研究中，腐解物料多以农业废弃物及城市污泥为主，对于落叶及草坪碎屑等园林废弃物的堆腐研究尚缺乏系统性报道，而对于微生物菌剂的研究多集中于复合菌。本研究拟采用室内培养法，将落叶与草坪碎屑按照2 ∶8的质量比混合，通过Bacillus subtilis和Trichoderma viride接种，对其总有机碳、养分性状及腐殖质组成进行动态分析，并揭示2类微生物在园林废弃物腐解特征上的差异，旨在为园林固体废弃物的资源化利用及高效菌剂的筛选提供科学依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　落叶于2015年10月取自吉林农业科技学院校内园林绿地，所属区域以栽植银中杨、垂柳及玉簪等地被植物为主。将收集好的袋装落叶带回实验室，剔除多余枯枝、保留落叶，105 ℃ 下作杀青处理，再在55 ℃下烘干至恒质量，粉碎过 1 mm 筛。经测定，落叶粉末中的总有机碳（TOC）、全氮（N）、全磷（P2O5）及全钾（K2O）含量分别为58.3%、2.24%、1.00%、0.77%。 　　草坪碎屑于2015年9月取自吉林农业科技学院A座教学楼前草坪绿地，草种由狗牙根、早熟禾属及羊茅属组成。将经旋刀式剪草机剔除的碎草屑带回实验室，重复上述步骤，但不作粉碎处理，仅用剪刀将碎草屑继续剪碎至0.20～0.25 cm 小段，随后将其保存于玻璃干燥器中。经测定，草坪碎屑中TOC、N、P2O5、K2O含量分别为58.4%、2.68%、120%、2.09%。 　　绿色木霉（Trichoderma viride，Tv），水谷欣品牌，江苏省盐城市神微生物菌种科技有限公司，原粉粉剂，50亿活孢子/g；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis，Bs），水谷欣品牌，江苏省盐城市神微生物菌种科技有限公司，粉剂，300亿/g。菌株悬液的制备方法：称取菌粉5.0 g置于100 mL离心管中，注入 100 mL 无菌水后以3 500 r/min的转速离心10 min，将固液分离，收集菌株悬液，无菌条件下保存，以防染杂菌。 　　1.2