雌雄蓖麻蚕减数分裂染色体比较研究.docVIP

雌雄蓖麻蚕减数分裂染色体比较研究 　　摘 要 以蓖麻蚕Philosamiacynthia心咸Boisduval为材料，全面比较了雌雄蓖麻蚕减数分裂前期1染色体的行为变化，从细胞学角度证明了雌蚕减数分裂染色体完全连锁，而雄蚕发生连锁交换；详细观察了雌蚕减数分裂1双线期过程中性染色体的动态变化，发现其存在着自身配对的过程，进而对其起源进化假说进行了探讨，认为其可能来源于一对同源常染色体片段的易位融合。 　　关键词 蓖麻蚕，减数分裂，染色体，进化 　　昆虫的许多性状与性别密切相关，而性别的决定和分化机制以及性染色体的进化历来是遗传学、细胞学和发育生物学等诸多研究领域的重要课题，在理论和实践上都有重要的意义。生物的性别主要由性染色体的组成所控制，其决定形式大致分为2大类4种：一类为雄异配性别(或雄异质性)，包括XY型和XO型2种；另一类为雌异配性别(或雌异质性)，包括zW型和ZO型2种。关于XO(或ZO)型性决定机制中，性染色体的起源与进化，迄今大致有2种观点：一种观点认为性染色体可能来源于1对同源常染色体的易位，在长期进化过程中易位染色体进一步演化为性染色体；另一种观点则认为，XO(或ZO)型是XY(或ZW)型中的Y(或W)染色体缺失所致。 　　蓖麻蚕FAilosamiacynthiaricini Boisduval属鳞翅目天蚕科樗蚕属，是除柞蚕外的另一重要野生绢丝昆虫。由于其抗逆性强、适应性广、饲养容易、生育快、饲养时间短，而在全国广泛饲养。蓖麻蚕的染色体由于其性型为ZZ―ZO，雄2n＝28，雌2n＝27。因其染色体数目只有家蚕染色体数目(2n＝56)的一半，且雌蚕性染色体为单价体，因而不仅是绢丝昆虫染色体研究的极好材料，也是ZO型生物性染色体进化的良好模型。由于蓖麻蚕多采用生殖腺制备染色体，且由于蓖麻蚕减数分裂在化蛹前特别旺盛，对于其雌蚕减数分裂过程已有相关报道。宋方洲发现了其性染色体具有“发夹”状结构，并通过统计得出性染色体是最短得染色体。对于雌雄蓖麻蚕减数分裂染色体的差异目前仅进行了双线期的比较。在已有研究的基础上，系统全面地比较了雌雄蓖麻蚕减数分裂前期的染色体差异，从细胞学角度证明了雌蚕染色体减数分裂完全连锁，而雄蚕发生连锁交换；并对雌蚕性染色体的动态变化进行了详细观察描绘，认为其可能来源于1对同源常染色体片段的易位融合。这不仅丰富了蓖麻蚕的细胞遗传学理论，而且对了解XO(或ZO)型生物的性染色体起源提供了参考资料，在实践上对蓖麻蚕的遗传育种有着指导意义。 　　 　　1 材料和方法 　　 　　1．1 材料 　　蓖麻蚕卵由广西蚕业研究所提供，让其自然孵化，幼虫室内饲养至5龄初作为实验材料。 　　 　　1．2 方法 　　1．2．1 染色体标本的制作：为了能观察减数分裂各时期染色体的形态，选择幼虫期5龄初至化蛹前期的生殖腺制作染色体标本。制作方法如下：将取出的精巢或卵巢(雌雄分开)放在载玻片上，在显微镜下剔除外膜和脂肪，置于低渗液(0．067 mol／L的KCl)中30min以上?将生殖腺吸出放在干净的载玻片，用固定液工(无水乙醇：冰醋酸：水二3：3：4)轻轻洗涤后，滴加1滴于生殖腺上，用解剖针将其切碎分开；然后滴加1―2滴固定液Ⅱ(无水乙醇：冰醋酸二1：1)，待固定液Ⅱ将干时滴加固定液Ⅲ(冰醋酸原液)1～2滴，自然风千保存。 　　1．2．2 染色体标本的染色及观察分析：将自然风千的染色体标本置于1：10稀释后的Giemsa原液中染色20～30min，经双蒸水稍稍洗涤后，空气自然干燥。用Olympus显微镜观察分析，雌雄蓖麻蚕减数分裂的染色体分裂相观察的数目均为100个，减数分裂前期染色体出现明显差异的分裂相的百分比率超过80％，雌蚕的性染色体表现出特异行为的分裂相约为75g，并对好的分裂相进行摄影。 　　 　　2 结果和分析 　　 　　2．1 雌雄蓖麻蚕减数分裂I前期染色体的比较分析 　　减数分裂形成配子时，同源染色体的非姊妹染色体发生交换是生物变异的一个重要因素，因此在减数分裂前期表现出极为复杂的形态行为，而有的生物却是染色体完全连锁，有着特殊的染色体行为。减数分裂的前期可以分为细线期、偶线期、粗线期、双线期、终变期5个时期。雄蚕精母细胞在偶线期同源染色体开始联会配对，粗线期联会完成，形成二价体，此时可见14个较粗弯曲的二价体(图1：A)；双线期同源染色体开始分离，此时雄蚕的同源染色体形成环状或倒“8”形的交叉结构，染色体末端连在一起(图1：B，箭头所示)。虽然交叉点不等同于交换点，但是交叉是交换的结果，因此很显然在雄蚕中同源染色体在粗线期发生了交换?随着同源染色体的进一步分离和染色体浓缩，在晚双线期有的同源染色体还处于半环状，有的已经收缩成团状(图1：C)，这可能是不同同源染色体的发生