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鸡骨香提取物抗炎镇痛作用实验研究 　　【摘 要】 目的：研究鸡骨香提取物的抗炎镇痛作用。方法：采用二甲苯实验、毛细血管通透性实验、角叉菜胶致大鼠足肿胀实验观察抗炎作用；采用醋酸扭体实验、热板实验观察镇痛作用。结果：鸡骨香醇提物、水提物能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加、角叉菜胶致大鼠足肿胀，醇提物作用显著优于水提物；醇提物能明显延长醋酸致小鼠扭体反应潜伏期，醇提物、水提物能减少醋酸致小鼠扭体次数、对小鼠热板实验痛阈值无显著影响。结论：鸡骨香醇提物和水提物均有抗炎、抗外周性疼痛作用，醇提物的抗炎镇痛作用优于水提物。 　　【关键词】 鸡骨香；抗炎；镇痛 　　【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）12-0008-03 　　鸡骨香为大戟科巴豆属植物鸡骨香Croton crassifolius Geisel.的干燥根，性温、味苦，具有理气止痛、祛风除湿的功效。在岭南民间常用鸡骨香根水煎或泡酒治疗风湿性关节炎、跌打损伤和黄疸等疾病[1-2]。迄今为止，鸡骨香化学成分的研究较多，对活性部位的药效学研究较少，本文对鸡骨香不同提取物的抗炎镇痛作用进行初步探讨，为确定鸡骨香活性部位/活性成分提供药效学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 药材及试剂 鸡骨香购自广东省药材公司，经广东药学院姜晓林副教授鉴定为鸡骨香Croton crassifolius Geisel的干燥根；角叉菜胶（批号：132K1003：美国Sigma公司）；盐酸喷他佐辛（批号北京双鹤药业股份有限公司）；吲哚美辛（批广东华南药业集团公司）；伊文思蓝（批号：100118，美国Sigma公司，）。 　　1.2 动物 SPF级ICR小鼠，体重18～22g；SPF级SD大鼠，体重180～220g，均由南方医科大学动物实验中心提供，动物合格证号2011-0054。 　　1.3 仪器 752N紫外可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；201型酶标仪（美国Sigma公司）；Almemo2390-5足肿胀度测定仪（深圳瑞沃德生命科技有限公司）；YLS-6A型智能热板仪（山东省医学科学院）。 　　1.4 方法 　　1.4.1 鸡骨香提取物制备 醇提物的制备：称取鸡骨香药材1.5kg，粉碎后用10倍量的95%乙醇浸泡30min，回流提取3次，提取???间依次为2h、1h、45min，合并提取液，过滤，减压浓缩回收溶剂，喷雾干燥，得醇提物干燥粉，用前用1%羧甲基纤维素钠（CMC）溶液研磨、配制成所需浓度的混悬液。 　　水提物制备：醇提后剩余药渣加10倍量水，加热提取2次，分别为2h、1h，合并提取液，过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得水提物干燥粉，临用前用1% CMC溶液研磨、配制成所需浓度的混悬液。 　　1.4.2 二甲苯实验[2] 取小鼠60 只，随机分为六组：模型对照组、吲哚美辛组、鸡骨香醇提物高、低剂量组、水提物高、低剂量组，每组10只，雌雄各半。按表1剂量灌胃给药，模型对照组给予等容积1%CMC溶液，1次/d，连续给药5d。末次给药后30min，取二甲苯30μl均匀涂于小鼠右耳前后两面，30min后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下左右耳廓，用直径7mm打孔器于左右耳同一部位打下圆耳片，称重，以左右耳片质量之差为肿胀度，计算肿胀度抑制率。 　　1.4.3 毛细血管通透性实验[2] 取小鼠60只，随机分为六组，每组10只，雌雄各半，动物分组及给药方法同“1.4.2”。末次给药30min后给予小鼠尾静脉注射0.6%伊文思蓝溶液10ml/kg，随即腹腔注射0.6%冰醋酸10ml/kg，30min后脱臼处死，打开腹腔，用5ml生理盐水洗涤腹腔，吸出洗涤液，合并，3000r/min离心15min，取上清液于595nm波长处测定吸收度A值，计算抑制率。 　　1.4.4 角叉菜胶致大鼠足肿胀实验[3] 取大鼠48只，随机分为六组，每组8只，雌雄各半，分组及给药方法同“1.4.2”，末次给药后30min，于右后足皮下注射1%角叉菜胶生理盐水溶液0.1ml，分别在致炎前和致炎后1、4、6h用足肿胀仪测量足爪容积，以致炎前后足爪容积的差值表示肿胀度。 　　1.4.5 醋酸扭体实验[4] 取小鼠60只，随机分为六组，每组10只，雌雄各半，动物分组给药方法同“1.4.2”，末次给药后30min，小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液10ml/kg，记录小鼠出现扭体反应的潜伏期以及20min内小鼠扭体反应次数。 　　1.4.6 热板实验[4] 将雌性小鼠置于预热（55±0.5）℃热板仪，以小鼠舔后足潜伏期为痛阈指标，实验前筛选出60只痛阈值在5～30s小鼠为合格小鼠，随机分为六组，每组10