金雀异黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞的保护作用-眼科学专业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文金雀异黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞的保护作用 南京医科大学硕士学位论文 金雀异黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞的保护作用 南京医科大学第一附属医院眼科 硕士研究生： 帅捷 导 师： 袁志兰 副教授 中文摘要 糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病微血 管最重要的病变之一，是一种具有特异性改变的眼底病变，已经 成为糖尿病患者致盲的首位原因．研究表明视网膜病变与自由基 介导的氧化损伤有关。氧化应激反应可调节细胞的生理功能和生 化反应，在细胞增殖分化过程中发挥重要作用，并可导致细胞凋 亡，促进新生血管形成。人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium，RPE)处于富含血管的脉络膜和视网膜神经上皮层之 间，是视网膜重要的营养、维护、代谢组织，视网膜色素上皮细 胞的特殊位置乖功能使其易受氧化攻击，造成氧化损伤，从而导 致多种视网膜病变． 金雀异黄素(Genistein，Gen)是大豆及大豆蛋白中所含的多酚 南京医科大学硕士学位论文类混合物，在预防乳腺癌，前列腺癌、心脑血管等疾病中起到重 南京医科大学硕士学位论文 类混合物，在预防乳腺癌，前列腺癌、心脑血管等疾病中起到重 要作用．以往的研究中，金雀异黄素作用机制主要集中在抑制酪 氨酸激酶，调控DNA拓扑异构酶及发挥雌激素的作用．近年来发 现金雀异黄素还是一种理想的抗氧化剂，具有加速脂质清除、抑 制自由基的产生，清除、熄灭自由基的作用，且其药物毒性小， 可能成为新的治疗糖尿病性视网膜病变的方法．在此，我们主要 观察高糖对RPE细胞增殖的影响，以；殳Genistein对高糖诱导NRPE 细胞的保护作用，并初步探讨了Genistein对高糖诱导NRPE细胞 的保护作用的机制． 我们体外培养A．RPE胞，分别以Gen0、50、100、200umol／L 的药物浓度作用高糖(33mmol／L)培养的RPE细胞48h，倒置显微 镜下观察细胞形态；噻唑蓝比(methylthiazolyltetrazolium，MTT) 检测细胞活性；流式细胞仪检测细胞周期；激光共聚焦显微镜检 测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平；黄嘌呤氧 化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD) 活，l!生． 南京医科大学硕士学位论文结果表明：与对照组与对照组相比，应用含33mmol／L葡萄糖的 南京医科大学硕士学位论文 结果表明：与对照组与对照组相比，应用含33mmol／L葡萄糖的 DMEM培养基处理RPE细胞48h可见细胞胞体变薄，形态表现多 样，不规则细胞增多；高糖可以抑制I冲E细胞增殖，高糖培养的 RPE细胞内活性氧(ROS)产生明显增多，超氧化物歧化酶活力 (SOD)降低，加入金雀异黄素预处理后，可抑制细胞增殖的作 用减弱，降低细胞内活性氧(ROS)的表达，增加细胞内超氧化 物歧化酶(SOD)活性，各指标差异有显著性(PO．01)，且金 雀异黄素的作用呈剂量依赖性． 通过以上研究，我们得出下列结论： 1．高糖抑制RPE细胞的增殖，Genistein减弱高糖对细胞增殖 的抑制作用。 2．Genistein主要通过降低细胞内活性氧的表达，增加细胞内超 氧化物歧化酶活性的途径发挥对RPE细胞的保护作用 【关键词】 ARPE-19；金雀异黄素；高糖；自由基； 南京医科大学硕士学位论文Protective 南京医科大学硕士学位论文 Protective effect of genistein on the hnman retinal pigment epithelium cell cultured in high glucose Department of Ophthalmology，the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University，，Nanjing 210029； Student： Jie SHUAI Direet： Zhi．Lan YUAN Abstract Diabetic Retinopathy，the most common microvascular complication of diabetes，is the first cause of blindness with specificity change of eyeground．Some studies have indicate that when hyperglycemia OCCURS retina may sufer oxidative damage mediated by free radical．I