亲磷脂酸磷酯酶A1研究进展.docxVIP

亲磷脂酸磷酯酶A1研究进展 左晓臣苏何玲刘永明(桂林医学院生物化学与分子生物学教研室广西桂 林 541004) 【摘要】亲磷脂酸磷脂酶Al (PA-PLA1)在细胞内水解磷脂酸分子上sn?l脂肪酸 牛成sn-2■脂酰溶血磷脂酸，从而影响脂类信号分子磷脂酸和溶血磷脂酸的信号 转导，提示该酶在细胞的信号转导中发挥重要的作用。木文拟就有关PA-PLA1的 基因克隆，一级结构特点，酶学特性以及牛理功能的研究作一综述。 【关键词】亲磷脂酸磷脂酶A1磷脂酸溶血磷脂酸信号转导 【中图分类号】R392.ll 【文献标识码］A 【文章编号】2095-1752 (2012) 10-0129-02 亲磷脂酸磷脂酶 Al (phosphatidic acid-preferring phospholipase Al, PA-PLA1)生理条件下对磷脂酸(phosphatidicacid, PA)具有高度的亲和性，在 细胞内水解PA分子上sn-1脂肪酸牛成sn?2■脂酰溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)o PA和LPA是细胞内重要的脂类信号分子，其信号转导涉及细胞生长、 增殖、囊泡输送和激素应答等多种细胞过程。PA-PLA1活性影响细胞内PA和LPA 信号水平，提示该酶在细胞的信号转导中发挥重要的作用。近年来，随着牛 PA-PLA1被分离，纯化与克隆，该酶的功能研究己见端倪。木文拟就有关PA-PLA1 的基因克隆，分子结构特点，酶学特性以及牛理功能的研究作一综述。 PA-PLA1的克隆与组织分布 牛PA-PLA1最先由华盛顿大学Glomset实验室报道⑴，并被从牛的睾丸 组织中分离、纯化与克隆［2,3］o牛PA-PLA1基因编码一个由875个氨基酸残基组 成的蛋白多肽，分子量为97576道尔顿，等电点5.61o PA-PLA1有特定的组织分 布，在成年牛的睾丸和脑组织中该酶具有较高的活性，其中成年牛睾丸组织的 PA-PLA1活性比新生牛睾丸组织的PA-PLA1活性高10倍，而在心脏、肝脏、脾脏 和血液中检测不到该酶的活性。PA-PLA1在成熟睾丸组织中的高活性被认为该酶 可能涉及精子的生成⑴。2005年从人的肾脏组织克隆的人PA-PLA1基因(GenBank accession no. DQ315474),该基因定位于 14q22, mRNA 长 2923bp,编码一个由 745个氨基酸残基组成的蛋白多肽⑷。序列比对分析结果显示，人PA-PLA1基因 序列与牛PA-PLA1基因序列高度一致，氨基酸序列比对表明人、牛和鼠的PA-PLA1 有很高的同源性。 PA-PLA1 一级结构特点 磷脂酶是脂肪酶超家族成员。系统进化分析显示，PA-PLA1在分子水平 上不同于内皮脂肪酶、脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶、胰脂肪酶和亲磷脂酰丝氨酸脂 肪酶，而与KIAA0725蛋白和pl25蛋白组成一个脂肪酶超家族中的亚家族。但 KIAA0725蛋白和pl25蛋白的脂肪酶活性中心保守序列为GX-S-XG［5,6］,而牛 PA-PLA1包含的保守序列为SX-S540-XG,在相应位置岀现的不是甘氨酸残基，而 是丝氨酸残基。通过S540A突变研究，已确定保守序列SX-S540-XG中的丝氨酸 540是牛PA-PLA1的亲核活性部位。人PA-PLA1相应的保守序列是 Ser408-HIS-Ser410-LEU-Gly412,与牛PA-PLA1相似，亲核活性部位也是丝氨酸残 基。 功能域分析显示PA-PLA1的C■末端氨基酸序列可形成DDHD结构域，该 结构域保守区含有大约180个氨基酸残基，包含金属离子结合位点。DDHD域绑 定到酪氨酸激酶PYK2上，参与调控G蛋白偶联受体下游的钙离子和磷酸肌醇的 代谢［7, 8］。此外，PA-PLA1序列有一个卷曲螺旋结构，该结构已被证实与该酶 的四聚体形成有关［3］。 PA-PLA1 KIAA0725p蛋白和pl25蛋白均是细胞内亲磷脂酸磷脂酶，但 它们在细胞中有不同的细胞定位和生理功能［9］。KIAA0725蛋白有助于从高尔基 体到细胞膜高效的细胞转运，但并不涉及布雷菲德菌素A (brefeldinA)诱导的 高尔基体内质网逆行转运。pl25蛋白与CopII包被成分Sec23蛋白相互作用，通 过其N?末端富含脯氨酸的区域影响由内质网产生囊泡。pl25蛋白过表达可导致 这些膜区室的消散。因而表明25蛋白参与早期分泌过程。PA-PLA1与细胞膜 相互作用，并对膜磷脂酸有很高的活性，提示PA-PLA1影响到由磷脂酶D和甘油 二酯激酶介导的依赖磷脂酸信号转导机制［10］ O PA-PLA1的酶学特性与生理功能 PA-PLA1酶学特性主要涉及以下几个方面：(1) PA-PLA1对PA水解的亲 和性是磷脂酰环己六醇(phosph