黄精首乌新制剂药学研究.pdfVIP

第一章黄精、何首乌药材含量测定的方法学研究 一黄精药材．多糖含量测定的方法学研究Iql2l 根据薪药研究注册技术要求、查阅文献及结合现有的科研条件，以葡萄糖 (AR)为对照，拟用紫外分光光度法测定黄精中多糖的含量。为黄精后续的提取 精制工艺提供客观的评价依据。 1．仪器、药品、试剂 ’ ’’ 752型紫外光栅分光光度计，DU一70 超声波清洗机(北京市医疗设备二厂)，SHB-3循环水多用真空泵(郑州杜甫仪器 厂)，葡萄糖(AR，天津大茂试剂有限公司)，黄精药材(购于贵州省药材公司，经鉴 定为多花黄精)，纯净水，其它试剂皆为分析纯。 2．药材含量测定及其方法研究 ， ‘ 2．1检测波长的选择 在200～700瑚波长范围内对葡萄糖溶液及样品溶液进行扫描，在490rm附近 有最大吸收，结合文献报道，确定检测波长为490ran。扫描结果见附图1。 2．2线性范围 、 精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖对照品适量，加水制成每iml含1．OOmg的 溶液。分别吸取该溶液0．1、0．2、0．4、0．6，0．8m1分置于具塞刻度试管中。依 mL摇匀，然后迅 mL．再各精密加入苯酚溶液I．0 次加蒸馏水使其总体积均为2．0 速精密滴加浓硫酸5．0mL，以涡流混悬器快速混匀．放置5min后置沸水浴中加热 mL，与上述操作同法加入苯酚溶液 ISmin，取出后迅速冷至室温；另以蒸馏水2．0 lira测定吸光度，以吸光 和浓硫酸，以此溶液作为空白对照．将上述各溶液于490 度为横坐标，对照品的量(mg)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程： 良好的线性关系。 2．3提取条件的考察 2．3．I提取次数对黄精中多糖的影响 ’ 先用80％的L醇除去药材中的低聚糖∞，再用沸水提取多糖，并考察不同的 沸水提取次数对多糖提取的影响。 方法：精密称取黄精药材约0．39，加入80％乙醇150ral回流提取lh，滤过， 用80％的热乙醇洗涤残渣及烧瓶，残渣并入烧瓶中，加沸水提取1次、2次或3次， lll， 每次提取1h，每次加沸水lOOml，滤过，放冷，定容至250mi。精密取300 加水至2ml，再各精密加入苯酚溶液I．0mL摇匀，然后迅速精密滴加浓硫酸5．0mL， 温；另以蒸馏水2．0mL，与上述操作同法加入苯酚溶液和浓硫酸，以此溶液作为 nnl测定吸光度，计算，每克黄精药材中多糖以葡 空白对照．将上述各溶液于490 萄糖计，平均含量分别为0．13569、0．14429、0．16989，结果见表1。 表l提取次数对提取多糖的影响结果 ， ． 由实验结果确定对黄精药材的提取方法如下：精密称取黄精药材0．39，加入 瓶中，加水提取3次，每次提取lh，每次加水lOOml，滤过，放冷，定容至250mi。 ll 精密取300l，加水至2ml，再各精密加入苯酚溶液l-0mL摇匀，迅速滴加 浓硫酸5．0mL，以涡流混悬器快速混匀．放置5min后置沸水浴中加热15min，取 出后迅速冷至室温；另以蒸馏水2．0mL，与上述操作同法加入苯酚溶液和浓硫酸， 以此溶液作为空白对照．将上述各溶液于490 nm测定吸光度，测定，计算。多糖 平均含量为17．45％，RSD--O．58％。结果见表2。 表2提取3次重复验证实验结果