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纳米材料增敏的表面等离子体共振生物检测研究 摘 要 生物医学检测在临床疾病诊疗、传染病防控、生物工程等方面发挥着重要作 用，已有多种基于不同原理的检测技术应运而生。在这些检测技术中，表面等离 子体共振（SPR，surface plasmon resonance ）技术，相较于传统的免疫检测手段 如ELISA 和RIA 等，具有无需标记、实时、在线监测等优点，因此得到了广泛 的关注。然而，受限于检测灵敏度，传统的SPR 难以实现对小分子量（500 Da ） 或低浓度的生物对象的检测，因此发展检测灵敏度提高的方法，是 SPR 生物检 测领域重要的研究方向之一。纳米材料是指在三维空间中至少有一维处于纳米尺 寸（1-100 nm）的材料，具有小尺寸效应和特殊的物理特性。本文结合两类纳米 材料即 MoS2 纳米花和金刚石纳米颗粒，探索和发展高灵敏的 SPR 免疫检测方 法，实现了对免疫蛋白IgG 和肿瘤标志物CEA 的高灵敏度检测。具体工作总结 如下。 1、提出了一种MoS2 纳米花和金纳米颗粒（AuNPs ）增敏的SPR 生物检测 方法，并将其应用于小鼠免疫蛋白IgG 的免疫测定。MoS2 纳米花和AuNPs 以物 理沉积方法依次修饰在传统 SPR 芯片的金膜表面，修饰后的传感芯片虽然折射 率灵敏度略有降低，但 IgG 检测灵敏度则由 0.016 nm/(μg/mL)提升至 0.047 nm/(μg/mL) ，检测极限可达到0.06 μg/mL，同时传感芯片表现出良好的特异性和 可重复性。分析结果表明，对IgG 灵敏度的提高可以归因于MoS2 特殊的花状形 貌，这增加了传感界面的比表面积，为特异性抗体的固定提供了更多的结合位点， 从而使更多的 IgG 抗体固定在传感芯片表面。该检测方法具有操作简单、成本 低、易于实现的优点，而且与传统的金膜表面生物活化方法兼容，避免了在MoS2 表面难以直接进行生物修饰的问题。 2 、基于纳米金刚石修饰的小角度SPR 检测肿瘤标志物CEA 。作为一种广谱 的肿瘤标志物，CEA 在恶性肿瘤的鉴别诊断、病情监测、疗效评价等方面具有重 要临床价值。本文中，一方面通过减小 SPR 检测系统中光的入射角度，另一方 面在传感芯片表面修饰羧基化的纳米金刚石颗粒，从而实现对CEA 的高灵敏免 RIU ： 疫测定。实验结果表明，改良后传感器的折射率灵敏度可达到12027 nm/RIU（ 折射率单位），对CEA 的检测极限则由未修饰纳米金刚石时的93 pg/mL 降低至 修饰后的41 pg/mL 。分析可知，检测灵敏度的提高可归结为以下两个因素：入射 III 纳米材料增敏的表面等离子体共振生物检测研究 角度的减小使 SPR 倏逝场增强，增强了体折射率灵敏度；纳米金刚石的修饰增 大了传感界面的比表面积，从而提升固定抗体的数量。该检测方法具有灵敏度高、 生物活化操作简单、易于实现的特点，适用于对小分子和低浓度生物分子的直接 免疫检测。 关键词：免疫检测；表面等离子体共振；纳米材料；免疫球蛋白G ；癌胚抗原 IV 纳米材料增敏的表面等离子体共振生物检测研究 Abstract Biomedical detection plays an important role in the fields of disease diagnosis and treatment, infectious disease prevention and control, biological engineering, etc. A variety of detection technologies based on different principles have emerged. Among them, surface plasmon