食品快速检测技术（新） 6.ATP生物发光快速检测 3.3.6 ATP生物发光原理 --电子教材.docxVIP

电子教材 《食品快速检测技术》电子教材 ATP生物发光原理 生物发光是生物有机体通过化学反应产生光亮的一种自然现象， 它广泛地存在于海洋中（特别是海洋深水处）， 水手或乘客通常在轮船的航行尾迹上可以观察到绚丽的色彩， 这就是由于海洋中的鞭毛藻和单细胞藻受到轮船运动刺激后产生的一种发光现象 。 除了海洋外， 地球其它部分的生物发光现象并不多见， 比如： 淡水湖中几乎不存在生物发光现象， 而陆地上则仅有在腐木中可以观察到的菌类发光（俗称狐火） 和少数昆虫（如萤火虫） 及无脊椎动物（如蚯蚓、 蜗牛等） 的发光。 1 生物发光的作用 对于发光， 我们自然能够想到的作用是照明， 而生物发光的作用则远不仅限于照明， 许多生物发光现象更多的是一种生物演化的结果。 （1） 探测照明： 海洋深处是黑暗的， 大部分深海生物发光均是用于照明， 由于蓝绿光（波长约 470 nm） 在水中传播距离最远， 所以深海生物发光基本以蓝色为主。 但是也有少数深海生物发出红光甚至红外光， 比如 Malacosteus、 Aristostomias、 Pachystomias 等（如图 1（a） 所示）， 虽然红外或红外光很容易被海水吸收而衰减， 但是由于其它的海洋生物不能探测到红光或红外光， 所以它们在捕食猎物时可以发现猎物而不会被猎物察觉。 （2） 伪装： 乌贼的身体是漆黑的， 而在深海处由于有其它生物发光和少部分的太阳 透射光， 所以背景往往呈现出微亮， 如果在如图 1（b） 所示的微亮背景中出现一大黑块是很容易被发现的， 所以乌贼则利用发光使自己的身体融入背景以逃避捕食者的眼睛。 另外，有些乌贼会根据所处海洋的深浅位置发出不同颜色的光， 也主要是为了 更好地融入周围环境， 因为在浅海处会更多地受到红光的影响。 （3） 引诱： 有些生物发光是为了 引诱猎物靠近并伺机捕食猎物。 如图 1（c） 所示的 Siphonophore， 它的触须由于发光呈透明状， 在触须尾部会释放出一种红色荧光物质作为诱饵， 由身体发光激发红色荧光物质而发射红光。 陆地上的有些菌类发光是为了吸引夜行者如娥类， 使它们作为花粉传播者。 （4） 恐吓或警告： 在紧急关头为了恐吓或警告自己的天敌， 有些生物会突然发光。如图 1（d） 所示的北极虾， 在紧急逃生时会发出绿色的荧光以惊吓追捕自己的猎手。 还有萤火虫的发光也有警示天敌的作用。 （5） 寻找配偶： 生物发光还有一个很重要的作用就是吸引配偶前来交配。 如图 1（e）所示的萤火虫， 不同种萤火虫的发光时间和频率是不一样的， 只有同种萤火虫才能相互辨认对方所发出的荧光信号， 对于成虫而言这就是求偶信号， 在识别求偶信号后双方就会会合一处进行交配。 （a） Aristostomias （b） Squid （c） Siphonophore （d） Pandalus borealis （e） Firebug 图 1 各种发光生物 2 生物发光的原理 自然界的生物究竟是如何发光的， 首先以萤火虫发光为例进行说明。 图 2 显示了萤火虫的发光器， 在显微镜下可以看到发光器由三个部分组成： 透明的表皮层、 黄色粉末状的发光细胞和黑色的反射层。 发光细胞是萤火虫发光的核心部分， 在它周围密布着神经和小气管，当氧气通过气管输送进入小气管内， 将被发光细胞捕获从而发光。 上面仅仅从生物构造上粗略地说明了生物如何发光， 为了进一步了解生物发光的本质， 接下来将分别从物理和化学角度解释生物发光。 图 2 萤火虫的发光器 2.1 生物发光的化学原理 生物发光的化学过程可以用公式（1） 来描述： 首先发光器中的荧光素与线粒体所分泌的三磷酸腺苷（ATP） 在荧光素酶和金属离子（如钙离子Ca 2+ 和镁离子Mg 2+ ） 的辅助下相互作用， 生成荧光素—腺苷酸和高能的焦磷酸酯； 然后荧光素—腺苷酸与气管输送进来的氧气反应生成激发态氧化荧光素和腺苷酸（AMP） ； 当氧化荧光素从激发态跃迁回基态时就会向外界发生出光。 从上面发光过程的分析中可以发现， 荧光素在生物体内转化为氧化荧光素是生物发光的关键， 而这一转化过程必须要有氧气参与， 因此只要切断氧气供给生物发光将不可能发生，事实上很多生物就是通过阻止氧气与荧光素作用来控制发光的。荧光素和氧化荧光素在化学结构上其实非常接近， 图 3 给出了萤火虫的荧光素和氧化荧光素的化学分子式， 可以看出它们只是右上角的功能团不一样， 即氧化反应仅仅使荧光素的分子结构发生了微小变化， 而这微小变化却决定了生物发光是否发生。 (a) 荧光素 (b) 氧化荧光素 图 3 萤火虫荧光素和氧化荧光素的分子式 此外， 从图 3 中荧光素的分子式中可以