(1)该技术定向改变了啤酒酵母菌的性状,这在可遗传变异的来源中属于________。? (2)为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内,所用的载体是________。? (3)题图中C进入的啤酒酵母菌分别在含有青霉素、四环素的两种选择培养基上的生长情况是____________________________________________。 【解析】(1)由题图可知该技术属于基因工程,该变异属于基因重组。(2)据题图可以看出,载体来自大肠杆菌,一定是质粒。(3)由于质粒上抗四环素基因被破坏,所以含有C的酵母菌在含有青霉素的培养基上能存活,但在含有四环素的培养基上不能存活。 答案:(1)基因重组 (2)(大肠杆菌的)质粒 (3)在含有青霉素的培养基上能存活,但在含有四环素的培养基上不能存活 【解析】 (1)EcoRⅠ识别的序列为GAATTC,切点在G、A之间,A正确;HpaⅠ识别的序列为GTTAAC,切点在A、T之间,B正确;EcoRⅠ切口在识别序列中轴线两侧,形成黏性末端,T4DNA连接酶既能连接黏性末端也可连接平末端,C正确;HpaⅠ切口在识别序列中轴线处,形成平末端,E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端不能连接平末端,D错误。(2)(3)限制酶能识别DNA分子的特定核苷酸序列,并从特定位点切割DNA分子。当特定核苷酸序列变化后,就不能被相应限制酶识别。 答案:(1)D (2)能识别双链DNA分子的特定脱氧核苷酸序列,并从特定的位点将DNA分子切开(或特异性) (3)不能。因为限制酶具有特异性,每种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定位点切割。 课时素养评价 十二 重组DNA技术的基本工具 【基础达标】 (20分钟·70分) 一、选择题(共7小题,每小题5分,共35分) 1.下列说法中不正确的有 ( ) ①限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 ②DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的 ③所有限制酶识别的核苷酸序列均由6个核苷酸组成 ④有的质粒是单链DNA A.①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④ 【解析】选C。限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,也有少数来自真核生物——酵母菌,①正确;T4 DNA连接酶来源于T4噬菌体(一种病毒),②错误;EcoRⅠ、SmaⅠ限制酶识别的序列均为6个核苷酸,也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成,③错误;所有的质粒都是双链的环状DNA分子,④错误。 2.如图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤,这一步骤需用到的工具酶是 ( ) A.DNA连接酶和解旋酶 B.DNA聚合酶和限制性内切核酸酶 C.限制性内切核酸酶和DNA连接酶 D.DNA聚合酶和RNA聚合酶 【解析】选C。目的基因和载体结合需“分子手术刀”——限制性内切核酸酶和“分子缝合针”——DNA连接酶。此过程不涉及DNA复制,不需要DNA聚合酶和解旋酶。 3.据图分析下列有关基因工程的工具酶功能的叙述,不正确的是 ( ) A.切断a处的酶为限制性内切核酸酶 B.连接a处的酶为DNA连接酶 C.切断b处的酶为解旋酶 D.切断b处的酶为限制性内切核酸酶 【解析】选D。a为磷酸二酯键,可被限制性内切核酸酶切断,A正确;a为磷酸二酯键,可被DNA连接酶连接起来,B正确;b为氢键,可被解旋酶切断,C正确;b为氢键,而限制性内切核酸酶切断的是磷酸二酯键,D错误。 4.如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 ( ) A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③② 【解析】选C。限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端或平末端,因此①符合;DNA聚合酶用于DNA分子的复制,能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来,因此④符合;DNA连接酶能在具有相同或互补碱基末端的两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,因此②符合;解旋酶能够将DNA分子的双螺旋解开,因此③符合。 5.下列有关如图所示的黏性末端的说法,错误的是 ( ) A.甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的 B.甲、乙具有相同的黏性末端,可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能 C.DNA连接酶的作用位点是b处 D.切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段 【解析】选C。据图可知,切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切 割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切 割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割),即甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产 生的,A正确。甲、乙的黏性末端互补,
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