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在线凝胶渗透色谱―气相色谱―串联质谱联用检测 烟叶中的农药残留 引言 为了防治病虫害，烟草在育种、种植、调制和保存期间要使 用农药。残留农药会降低烟叶质量，加剧环境污染， 并威胁人 类和其它生物的健康 [1] 。因此，烟叶中的农药残留检测对保证 烟叶质量和环境安全具有重要意义。 由于烟叶样品基质复杂， 其 中残留农药含量低(低至 ng/g 级)，因此通常需要样品预处理 过程才能进行后续测定 [2] 。目前，液-液萃取[3] 、固相萃取 [4] 、 固相微萃取 [5] 等方法已用于烟叶中农药残留测定。这些方法存 在有机溶剂消耗量大、操作繁冗费时、回收率低等不足。 Anastassiades 等 [6] 开发了“快速、简便、经济、高效、耐用 且安全(Quick , easy , cheap , effective , rugged and safe , QuEChEF) ”的样品前处理技术。 QuEChER方法具有回收率高、 稳定性强和被分析目标物范围广等优点， 因此在农药残留检测中 广泛应用⑶。常规QuEChER方法在净化步骤中通过离心或过滤 将吸附剂与样品液分离，耗时费力。为了克服这一缺陷，本研究 组以石墨化炭黑/乙二胺-N-丙基键合硅烷/四氯化三铁 (GCB/PSA/Fe3O4复合材料为吸附剂，改进了 QuEChER方法 [7] ，吸附剂可以在磁场作用下与提取液快速分离，具有操作简 单、快速高效的优点。 在线凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱（GPC-GC-M）是将凝胶 渗透色谱和气相色谱 -质谱在线联用的分析检测技术，不但具有 抗基质干扰能力强、灵敏度高的优点，而且可以连续自动分析， 能提高分析速度和结果的准确性，已被应用于农药残留检测［8? 10］。本研究采用改进 QuEChER方法对烟叶样品前处理， 以在线 凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱（GPC-GC-MS/M）检测，选取 烟草种植生产中对烟叶质量和烟草制品产品安全有影响的常用 10种除草剂、抑芽剂和杀虫剂为代表性化合物，建立了烟叶中 农药残留量的快速、准确、灵敏分析方法。 实验部分 2.1 仪器与试剂 在线GPC-GC-MS/M系统（日本岛津公司）,GPC配有LC-20AD 泵，SIL-20A自动进样器，CTO-20AC柱温箱，DGU-20A3R兑气机 和SPD-20A紫外检测器；GC-MS/MS包括日本岛津2010-plus气 相色谱和TQ8030三重四级杆质谱，由FCV-12AH电磁阀实现GPC 和GC-MS/MS勺在线连接。用Quanta 200扫描电镜（Quanta 200, FEI， Holland ）对材料形貌进行表征。 环己烷和丙酮（色谱纯，韩国德山纯化工 XX公司）。所用 水由Milli-Q 系统（Milford , MA, USA）制得。10种目标物 和内标（磷酸三苯酯）均购自德国 Dr. Ehrenstorfer 公司，以 甲苯（必要时添加丙酮或甲醇）为溶剂配制目标物母液（ 100 卩g/mL）。混合标准工作溶液（内标浓度为 20 ng/mL ）以甲苯 配制，并在-20C下避光保存。采用溶剂热方法制备 Fe3O4[7]: 在200 mL反应釜内将5.0 g FeCI3?6H2O 溶解在100 mL乙二醇 中并搅拌得到澄清溶液，再加入 15.0 g NaAc和50 mL乙二胺， 搅拌30 min，将反应釜于200C下反应8 h。待反应釜降温后， 用水和乙醇清洗产物， 60 C下干燥，备用。制备磁性吸附剂时， 将0.4 g GCB、0.5 g PSA 和1 g Fe3O4置于15 mL具盖玻璃瓶 内，用5 mL乙腈清洗3次后，将产物在60C下干燥即可。 仪器条件 GPC条件：色谱柱为 Shodex CLNpakEV-200 (150 mmx 2 mm 16卩m ;柱温为40C;流动相为环己烷-丙酮(70 : 30, V/V ); 流速0.1 mL/min ;进样量10卩L; GPC攵集时间为3.30?5.30 min; GC-MS/MS^件：惰性前置柱 5 m X 0.53 mm 空柱；预柱 DB-35 ms (5 m X 0.25 mm X 0.25 卩 m)，分离柱 DB-35 ms (25 mX 0.25 mmX 0.25卩n)，柱温箱程序：初始温度 82C, 保持5.0 min，再以8C/min升至300C，保持7.75 min ;不分 流进样，进样时间7.0 min；高纯He为载气，压力程序：由120 kPa 开始，以 100 kPa/min 升至 180 kPa，保持 4.4 min，再以 49.8 kPa/min 恢复至原始压力，保持 33.8 min ;程序升温进样 口程序：120C保持 5 min,以 100C/min 升至 250C，