临床免疫检验实验课件：金免疫测定技术.pptVIP

金免疫技术 金免疫技术 技术类型 金免疫组化技术：免疫电镜、免疫光镜 金免疫测定技术 －斑点金免疫渗滤试验 －金免疫层析试验 斑点金免疫渗滤试验和金免疫层析试验均属于固相膜免疫测定技术，以微孔膜为固相载体，最大特点是简便快速。 以下均以双抗体夹心法测定尿中HCG（人绒毛膜促性腺激素）为例。 主要材料 试剂盒：渗滤装置、免疫金、洗涤液 器材：一次性滴管 标本：尿液 操作步骤 （1）将反应板平放于实验台上，于小孔内滴加尿液5滴，待完全渗入。 （2）于小孔内滴加免疫金试剂3滴，待完全渗入。 （3）于小孔内滴加洗涤液2～3滴，待完全渗入。 （4）目测观察结果 结果判断 在膜中央有清晰的红色斑点者判为阳性反应，说明标本HCG阳性；反之则为阴性反应，说明标本HCG阴性。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强度。 结果书写 例如：1号标本醋酸纤维膜中央出现红色斑点，该标本为HCG阳性 注意事项 注意试剂的保存及使用温度。 正确操作，注意加入尿液样品量和免疫金试剂量。 尽量采集晨尿进行检测 主要材料 层析条 标本：尿液 操作步骤 （1）将试剂条的加样端浸入尿液中2-5s或在标本加样加一定量待测尿液处，平放于桌面上。 （2）5-15min内，目测观察结果。 结果判断 注意事项 （1）打开层析条包装后应在1h内应用。 （2）将层析条插入样品中，样品的液面不能超过试剂条的标记线。 （3）尽量采集晨尿进行检测 应用与评价 这两种方法具有操作简便、快捷以及操作人员不需技术培训，无需特殊仪器设备，试剂稳定、便于保存等特点，因此特别符合POCT项目的要求。 只作为定性或半定量试验，主要用于正常体液中不存在的物质（如传染病抗原和抗体等）和正常含量极低而在特殊情况下异常升高的物质（如HCG等）的检测。 金免疫测定技术灵敏度不及酶标法和酶发光免疫测定法，在临床应用中应引起高度重视。 * * 金免疫技术：利用胶体金颗粒标记抗体或抗原，以检测未知抗原或抗体的方法。 胶体金：金盐（HAuCl4）被还原成金原子后形成的金颗粒悬液，因呈稳定的胶体状态，故称为胶体金。胶体金颗粒聚集后呈现红色。 胶体金颗粒与蛋白质通过静电引力而结合形成免疫金 斑点金免疫渗滤试验 胶体金颗粒聚集后呈现红色斑点 金免疫层析试验 阴性 阳性 阳性 阴性 无效 T C *