临床生物化学检验实验：实验4 对比试验及方法评价试验的性能判断.pptVIP

实验27 临床生化检验方法学评价试验 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 单击此处编辑母版标题样式 * 实验四  对比试验及方法评价实验的性能判断 实验原理 用两种方法同时检测一批样本，计算出两种方法间测定结果的差异，用以估计试验方法在检测样本时可能引入的误差。当选择准确度已知的常规方法作为比较方法时，部分误差来自比较方法，其他部分误差则来自试验方法。若选择准确度高的参考方法作为比较方法，可把方法间的任何分析误差都归于试验方法。本实验以HK法测定血糖的参考方法作对比来评价GOD-POD法测定血糖的总系统误差。 * 试剂与器材 1.GOD-POD法试剂盒 2. HK法试剂试剂盒 3.血清标本40份（其浓度尽可能覆盖线性范围）。 * 500nM 操作步骤 1.取40份血清标本，每份标本用GOD-POD和HK两种方法，分别作双份测定。 2.每组两人，每人测定10个标本，共计40个标本。实验报告写40个标本。 * 对比试验-HK法测定结果ABOTT C8000 * * 加入物 B S 1 2 3 4…… 血清 （μl） － － 20 20 20 20 标准液（μl） － 20 － － － － 蒸馏水(μl） 20 － － － － － 工作试剂（ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 混匀，置37℃水浴10分钟，500nm波长，空白管调零，读取测定管和标 准管的吸光度值（A） 标本测定按下表操作 计算 1.将实验结果作散点图，图中以x轴代表比较方法的测定值，y轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上作图应散布于整个测定范围之内。 通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若所有测定值在坐标图中大致呈45°角的直线分布，提示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密切的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计学上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实验方法被采用的可能性极小。 2.如果x、y之间呈直线关系，可作直线回归的统计处理，计算回归方程y=a+bx和相关系数r。其结果可以显示实验方法的测定结果有无系统误差存在。截距a反映恒定系统误差的大小，斜率b反映比例系统误差的大小，相关系数r反映两种方法相关性的密切程度（相关计算公式请参阅统计学教材）。 * * 在评价一个实验方法时，最理想的情况是回归直线呈45°角通过零点，这时a=0，b（x/y比值）=1.0，表明恒定系统误差和比例系统误差均不存在。但x和y都会有随机误差，a和b只是估计值，会有所波动，只要偏离程度比较小，该方法就能用于临床检验的常规分析。相关系数（r）可作为被评价方法可否被接受的一项统计学指标。 理想情况 3.根据计算出的回归方程的a、b值，可以计算候选方法系统误差（SE）的大小，并与不同医学决定水平（Xc）的允许误差（EA）作比较，对被评价方法的系统误差的可接受性作出判断。SE的可接受性判断指标为 血糖测定的Xc=2.8 mmol/L、6.7mmol/L、8.9mmol/L时，Barnett提出的EA值为0.56mmol/L。 作为比较方法,理论上要求应该没有误差, 但在临床实验室这是不可能达到的, EP9-A文件指出,如果比较方法(X)的取值范围有足够宽,比较方法的这种误差在回归分析中可忽略不计。可用相关系数(r)来粗略估计X取值范围是否足够宽。r≥0.975(或者是r2≥0.95)则认为X范围适合。 注意事项 1.选择试验样品 一般作40~100例，包括常规工作中可能遇到的整个分析范围（其中25%的标本低于参考范围下限，50%标本在参考范围之内，25%标本高于参考范围），选择合适的样品分析范围比增加样品的数目更为重要。 2.试验方法 一般每个样品用两种方法各测一次，最好每个样品用两种方法各测定两次，在做双份第二次测定时，标本顺序应全部倒过来，最好在4h内完成。 3.对比方法 对比方法的选择十分重要，一般应选参考方法或决定性方法，这样方法间的任何分析误差都可归于被评价的候选方法。 *