医学细胞生物学教案-补体系统.docVIP

PAGE PAGE 6 §5 补体系统 §5-1 概 述 补体的发现和研究： 补体是免疫学研究中最古老的领域之一。 1869年Creite发现有些动物的血清能溶解另一些动物的红细胞。 1888年Nuttall观察到一些细菌能被某些动物的血清杀死。 1889年Buchner证明血清不仅能杀死细菌，而且当血清55℃加热1h则失去溶菌活性，它将血清中这种热不稳定的杀菌物质称为防御素（alexin）。 1895年Bordet证实血清溶菌需要两种因子，一种对热稳定，只存在于免疫血清中，后鉴定是特异性抗体；另一种对热敏感，存在于动物的正常血清中，无特异性。随后他深入研究证实溶血反应也需要这两种因子，在这些研究的基础上，他于1898年建立了补体结合试验。 1899年Ehlich将这种不耐热的因子命名为补体（complement），即辅助抗体作用的意思。 20世纪40～50年代发现补体替代途径，80年代末90年代初发现凝集素途径。 从20世纪80年代至今几乎所有补体成分的基因被克隆、染色体定位，并获得多种基因工程产物。 概念：是存在于动物体内具有多种免疫效应功能的、最复杂的酶反应系统，在哺乳动物中由近40种可溶性和膜结合蛋白成分组成，称为补体系统（complement）。是人体内最重要的非特异性免疫分子。 一、补体系统的组成和命名 （一）补体系统的组成 见表 ①补体固有成分：存在于体液中参与补体活化级联反应； ②补体调节蛋白：以可溶性或膜结合形式存在； ③补体受体(complement receptor,CR)：存在于细胞表面。 （二）补体系统的命名 ①经典途径补体成分命名：C1~C9；C1三个亚单位：C1q、C1r和C1s。 ②其它成分命名：以英文大写字母或功能命名； ③裂解片段命名：在符号后以小写英文字母表示，a表示小片段，b表示大片段。 ④有酶活性或灭活成分的命名：在字符上划一横线表示有酶活性，在字符前加i(inhibitor)表示失活。 二、补体的生物合成、代谢和理化特性 （一）补体的生物合成和代谢 1．补体的生物合成：血清补体成分含量约占血清蛋白的10％，急性期应答时可增高3～50倍。 许多组织和细胞都能合成补体成分，但是肝脏是主要部位，血清补体成分约90％是由肝脏合成的。在应激性反应时巨噬细胞分泌作用的增强，可提高局部补体效应水平。 2．补体的代谢：补体的代谢率极快，血清补体蛋白每天约更新50％，在疾病状态下，补体的代谢可发生更为复杂的变化。 （二）补体的理化特性 见表 ①补体成分均为糖蛋白，并且多为β球蛋白； ②在正常生理情况下，血浆补体除个别成分外（如D因子），均以无活性的酶原形式存在，只有在激活物的作用下才被活化。 ③不同补体分子之间血清含量和分子量相差较大：含量最高的是C3，最低的是D因子、MBL；分子量最大的是C4bp、C1q、MBL，最小的如D因子。 ④补体最易失活，补体在－70℃以下可长期保存。实验中为灭活补体活性，常用56℃加热30min 的方法处理血清等体液标本。 §5-2 补体的激活 补体活化是一个放大的级联反应过程，补体活化后才能发挥免疫效应。 补体的激活根据其激活物及起始成分不同分为三条途径： ①经典途径(classical pathway)； ②旁路途径(alternative pathway)； ③凝集素途径(lectin pathway)。 三条途径都最终形成膜攻击复合物（membrane attack complex, MAC），破坏靶细胞。 所谓的经典途径是因为它被最早认识，但在种系进化和发挥抗感染等效应作用过程中，旁路途径和凝集素途径要比经典途径出现得早。 一、补体活化的经典途径 （一）激活物与激活条件 1．激活物：主要是免疫复合物（immune complex，IC）。 2．激活条件：C1q须与IC中的抗体交联才能活化补体。 ①IgM：一分子的IgM即可激活补体，结合C1q的部位在CH3区。 ②IgG1-3：IgG至少需要两个分子，结合C1q的部位在CH2区。 （二）激活顺序 见图 1．识别阶段：是C1q识别激活物，相继活化C1r和C1s的阶段。 C1r和C1s具有丝氨酸蛋白酶的活性。C1r和C1s活化时，均在分子的精氨酸和亮氨酸残基间被断裂成大小两个片段，因两个片段间有二硫键相连，故整个分子并未断裂，酶活性均在小片段上。 2．活化阶段：是活化的C依次裂解C4、C2，形成C3转化酶，继而活化C3，并形成C5转化酶的阶段。 因C4b、C3b具有硫酯键，产生后大部分被水解而失去活性，只少部分（小于10％）与靶细胞表面的羟基或氨基共价结合保持活性。见图 C3转化酶和C5转化酶的酶活性存在于C2b上，能分别裂解C3和C5。 3．膜攻击阶段：此阶段形成MAC（