食品安全国家标准 食品中酵母β-葡聚糖的测定2023-标准全文及说明.pdfVIP

中华人民共和国国家标准 GB — ×××× ×××× 食品安全国家标准 食品中酵母β-葡聚糖的测定 （征求意见稿） ××××-××-××发布 ××××-××-××实施 GB ××××— ×××× 食品安全国家标准 食品中酵母β-葡聚糖的测定 1 范围 本标准规定了食品中不溶性酵母β-葡聚糖的测定方法。 本标准适用于乳及乳制品、蛋白粉、婴幼儿配方食品、糖果、饮料中不溶性酵母β-葡聚糖的测定。 2 原理 试样经蛋白酶和/或脂肪酶去除脂肪、蛋白质后，通过离心将酵母β-葡聚糖进行沉淀。沉淀后的酵 母β-葡聚糖在多种酶的作用下水解为葡萄糖。利用葡萄糖氧化酶（GOD ）在有氧条件下催化葡萄糖氧 化，生成D-葡萄糖醛酸-d- 内酯和过氧化氢，过氧化氢经过氧化物酶（POD ）催化与4-氨基安替比林和 对羟基苯甲酸生成红色醌亚胺（GODPOD法）。利用分光光度计在510nm波长处测定醌亚胺的吸光度。 最后通过酵母β-葡聚糖和葡萄糖的转化系数（0.9 ），计算得出样品中酵母β-葡聚糖的含量。 3 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的三级水。 3.1 试剂 3.1.1 碱性蛋白酶，液体，酶活力≥240 000 U/mL。 3.1.2 中性蛋白酶，液体，酶活力≥80 000 U/mL。 3.1.3 酸性蛋白酶，液体，酶活力≥50 000 U/mL 。 3.1.4 脂肪酶，液体，酶活力≥20 000 U/mL。 3.1.5 乙二胺四乙酸四钠二水合物（C H N Na O ·2H O ）。 10 14 2 4 8 2 3.1.6 三羟甲基氨基甲烷（tris ）（C H NO ）。 4 11 3 3.1.7 冰乙酸（CH COOH）。 3 3.1.8 无水乙酸钠（CH COONa ）。 3 3.1.9 氯化钠（NaCl ）。 3.1.10 氢氧化钾（KOH）。 3.1.11 氢氧化钠（NaOH）。 3.1.12 盐酸（HCl）。 3.1.13 溶壁酶，酶活力≥200 U/mg 。 3.1.14 β- (1,6)-葡聚糖酶，酶活力≥2 U/mg 。 3.1.15 β- (1,3)-葡聚糖酶和葡萄糖苷酶混合酶，酶活力分别≥100 U/mL 和20 U/mL 。 3.1.16 葡萄糖氧化酶，酶活力≥400 U 3.1.17 过氧化物酶，酶活力≥1 000 U。 3.1.18 4-氨基安替比林。 3.1.19 磷酸二氢钾。 3.1.20 对羟基苯甲酸。 1 GB ××××— ×××× 3.1.21 叠氮化钠。 3.1.22 滤膜：孔径0.45 μm 。 3.2 试剂配制 3.2.1 蛋白酶混合溶液：分别吸取2.0 mL 碱性蛋白酶和中性蛋白酶于5 mL 离心管中，混匀，4 ℃ 保存。临用现配。 3.2.2 氢氧化钾溶液（2.0 mol/L ）：称取11.2 g 氢氧化钾，加水溶解并稀释至 100 mL，混匀后，4 ℃ 冷藏保存。 3.2.3 氢氧化钠溶液（1.0 mol