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植物激素的免疫定量分析 植物激素免疫定量分析主要有放射免疫分析 （RIA）和酶联吸附免疫分析 （ELISA），由于 前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA 中，抗原抗体反应的检测依靠酶 标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，称为酶标 植物激素，也可标记于第二抗体 （识别抗激素抗体Fc 片段的抗体或金黄色葡萄球菌A 蛋白）， 称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相抗体型和固相抗原型 ELISA。 一、固相抗体型 ELISA 法测定 ABA 将抗ABA 甲酯 （ABAme）的单克隆抗体 （MAb）与已吸附于固相载体上的兔抗鼠Ig抗体 （RAMIG）结合，然后加入ABAme 标准品或待测样品，使其与固相化的MAb 结合，再加入辣 根过氧化物酶标记 ABA （HRP-ABA）。通过测定酶标 ABA 的被结合量，可换算出样品中未 知的ABA 的数量。 1.仪器设备 酶联免疫检测仪、高速冷冻离心机、恒温箱、连续进样器、涡旋仪等。 2.操作方法 1）材料：高等植物、真菌、藻类等。 2）激素的提取：取新鲜样品200～500mg （准确至0.1mg），分3 次加入80%甲醇共3ml， 冰浴匀浆，匀浆液于4℃，5000×g 离心10min