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尿素含量的测定 尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。 1.仪器设备 研钵、台式离心机、分光光度计、恒温水浴。 2.操作方法 取2g菜豆鲜叶，置研钵中，加入2mlpH7 的磷酸缓冲液，研磨成匀浆态，转入50ml 量筒 中，以水稀释至50ml，混匀。取10ml 悬浮液，放入离心管中，再加入2ml 尿酶溶液，混匀。离 心管浸入45℃（不低于40℃）的水中，10min 后，加入2ml 磷钨酸，混匀。3～5min 后，以2000×g 离心3min，取10ml 上清液转放到18~20ml 试管中，以麝香草蓝次溴酸法测氮。为此，加入0.5ml 正丁醇溶液，摇动直至丁醇溶解。然后加入2ml4%麝香草酚溶液，混匀。如出现混浊或沉淀， 则加入 1～2 滴20%的NaOH 使其溶解。向溶液加入3ml 次溴酸钠，混匀。再静置 10～15min 分 层。弃去下部水层，后转放到5 或10ml 量瓶中，加10 滴酒精使浑浊消失，以丁醇补足至5ml。 取透明溶液以分光光度计于波长660nm （比色杯径10mm）处测得光密度值，并与对照作比较。 按下面公式计算尿素含量。 X （尿素含量mg/100g样品） （2143×50×14×5×C）/ （10×10×n） 7.5×C/n 式中：50 为分