粮食与食品微生物学 课件 7.3 单细胞微生物的连续培养和高密度培养.pptx

知识点3：连续培养、高密度培养和同步培养第三章 微生物生理学第三节 微生物生长 分批培养的缺点通过连续培养（开放培养）来解决这个问题 由于营养物质的不断消耗，代谢产物的不断积累，微生物的生长环境变得恶劣，对数生长期结束后很快进入稳定期，停止生长，不能长期保持稳定、高速生长状态，效率低，自动控制能力差等 目 录一、连续培养二、高密度培养三、同步培养 一、微生物的连续培养连续培养——当微生物以单批培养的方式培养到对数生长期的后期时，一定流速输入新鲜培养液（如需要，通入无菌空气）并流出培养物，确保流出老菌数等于新增殖数，使培养保持对数生长的过程。目的——使微生物的液体培养物长期维持稳定、高速生长状态 单批培养与连续培养的关系 连续培养装置结构示意图培养液储备瓶蠕动泵恒化器收集瓶 连续培养的（按控制）方式恒浊法：保持细菌培养液浊度，可以根据培养液中的微生物的浓度，通过光电系统观控制培养液的流速，从而使微生物高密度的以恒定的速度生长。恒浊反映的是细胞密度的恒定。应用范围：单细胞微生物；收获菌体和与菌体生长平行的代谢产物 恒浊培养装置 连续培养的（按控制）方式恒化法——保持细菌培养液营养物质浓度恒化器，是指一种使培养液的流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置。因而可使微生物的生长速率正好与恒速流入的新鲜培养基流速相平衡，保持稳定的菌体密度。 恒化培养装置应用范围：不同生长速率的菌体 二、高密度培养概念：微生物在液体培养时，细胞密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术起因：现代高密度培养技术主要是在用基因工程菌大肠杆菌生产多肽类药物（人生长激素、胰岛素、白细胞介素类和人干扰素）的实践中逐步发展起来的 优 点通过提高菌体培养密度，提高产物的比生产速率（单位体积、时间产物的量）减少培养容器的体积和培养基的消耗缩短生产周期等 进行高密度培养的方法选取最佳培养基成分和各成分含量。适时补料，这是工程菌高密度培养的重要手段之一。提高溶解氧的浓度，提高好氧菌和兼性厌氧菌培养时的溶氧量也是高密度培养的重要手段之一。防止有害代谢产物的生成保持合适pH值 三、同步培养微生物个体生长是微生物群体生长的基础，但群体中每个个体可能分别处于个体生长的不同阶段，它们的生长、生理与代谢活性等不一致，出现生长和分裂不同步。给研究生理与遗传带来困难，工业发酵的种子带来不利通过同步培养后，使细胞处于同一生长阶段、同时分裂的生长方式。 获得同步生长的方法 抗生素、变换温度、光线、培养基等 硝酸纤维素膜法和离心法 硝酸纤维素膜法原理与步骤一些细菌细胞会紧紧粘附于具不同电荷的硝酸纤维微孔滤膜上。菌悬液通过微孔滤膜，细胞吸附其上；反置滤膜，以新鲜培养液通过滤膜，洗掉浮游细胞； 除去起始洗脱液后就可以得到刚刚分裂下来的新生细胞，即为同步培养。这种细胞在培养过程中，一般经2 – 3个分裂周期就会丧失其同步性。原理步骤缺点 小结在深入研究单细胞微生物（细菌和酵母菌）生长曲线的基础上，人们创造了连续培养理论和技术。20世纪后期，由于利用工程菌生产多肽类药物的需要，推动了以大肠杆菌为代表的高密度培养技术的发展，提高了生产效率。 THANK YOU感谢聆听，批评指导