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鸡马立克氏病病毒研究进展 马齐克病（md）是马齐克病毒科的一种常见的流行病。它以淋巴组织的增生和肿瘤形成为特征，并在外周神经、腺体、粘膜、各种器官、肌肉和皮肤上形成单核细胞浸润。MD在临床上引起肿瘤和死亡的同时, 更重要的是损害感染鸡的免疫器官, 造成免疫抑制状态, 导致机体抵抗力下降和对接种疫苗的免疫应答降低或不应答, 引发其他多种疾病的并发和继发感染, 造成巨大的经济损失。 世界动物卫生组织 (OIE) 已将MD归为动物B类传染性疾病。该病是第一个能用疫苗预防的肿瘤性疾病, 因此受到了医学界、兽医学界、病毒学界的广泛关注。到目前为止, 还没有有效的方法来治疗MD患鸡, 但能通过疫苗预防控制该病的发生, 所以对MD疫苗一直是国内外众多学者研究的热点。 1 mdv基因组突变 MDV是一种细胞结合性病毒, 分为三个血清型:I型为致瘤的MDV;II型为不致瘤的MDV;Ⅲ型为HVT。病毒核衣壳呈六角形, 85~100nm;带囊膜的病毒子直径为150~160nm:羽囊上皮细胞中的带囊膜病毒子大小为273~400nm。 MDV基因组为166~184kb的线状双股DNA, 是一种典型的疱疹病毒, 以往归于疱疹病毒亚科, 近年来通过基因组排列和基因分析, MDV-1、2、3型的基因组酶切图谱均已建立, 基因组的结构排列与简单疱疹病毒相同。在长独特区和短独特区的两侧均有倒置重复序列, 故将其归于致瘤的疱疹病毒亚科。MDV基因组末端重复序列为E类排列, 与人单纯疱疹病毒 (HSV) 、水痘带状疱疹病毒 (VZV) 基因组相同。MDV基因组很容易突变, 最明显的证据是在常规减毒试验中, 经过一系列培养细胞传代, 病毒基因组可发生突变, 导致病毒致瘤性减弱、A抗原丢失、在体外复制加快、返回体内后效价降低、溶细胞感染力下降、在淋巴细胞内失去复制能力、由羽毛囊内向外排毒减少、水平传播能力也随之下降等。韦平等利用设计的引物及设定的PCR反应条件, 从所有的标准参考毒株及中国野毒株模板DNA样品中均扩增出与预计大小 (1.1kb左右) 相符的目的产物。但DNA序列比较却表明:MDV-1不同型的meq基因序列相对比较保守。它们相互间核甘酸的同源性均在95.6%~98.8%, 两个疫苗毒株CVI988/Rispens和814均缺失了meq基因ORF中的第575~577位的3个碱基 (CAC) 。而属强毒株的GA株 (v MDV) 、648A (vv+MDV) 、中国的两个野毒株N株和G2株在这个位点则完全保持不变。此外, 在其它位点的碱基也有一些随机的变异。在MDV的3个血清型中, 仅有血清I型病毒 (MDV-1) 可致肿瘤, 血清Ⅱ型 (MDV-2) 和血清Ⅲ型 (MDV-3) 均无致瘤性, 而被用做疫苗来防治MD。Witter等提出, 根据病毒的致病性或致瘤性可将MDV-1的众多毒株分成如下4种致病型:几乎无致病性或致瘤性的温和型 (m MDV) 、强毒型 (v MDV) 、超强毒型 (vv MDV和特超强毒型vv+MDV) 。在过去几十年中, 虽然已从病理学、病毒学、生物学、免疫学和分子生物学的角度对MDV诱发的肿瘤作了大量研究, 但MDV诱发淋巴细胞转化为肿瘤细胞的分子机制仍不清楚。根据分子病毒学研究, 有3个基因被认为可能与MDV的致瘤性有关:由MDV基因组的Bam HI-H片段中的132bp重复序列及由该片段转录产生的1.8kb RNA家族, 38kd磷蛋白 (pp38) 基因和meq基因。另外还发现这3个基因对于维持马立克氏病 (MD) 肿瘤细胞系来说是必要因素, 因为132bp、pp38和meq的转录子可抑制MD肿瘤细胞系MSB1细胞的增生。上述1.8kb RNA家族存在于致瘤性MDV中, 这一基因家族在人工致弱的MDV中却被部分地切除了。在疫苗毒CVI988株中的132bp重复片段趋向于产生更多的拷贝。 2 mdv基因组整合 MDV在易感鸡的发病过程可分4个阶段:早期溶细胞感染、潜伏期感染、后期溶细胞感染和免疫抑制、转化。无细胞病毒虽然存在于其它所有组织和细胞培养物中, 但仅可从羽毛囊上皮分离到病毒, 主要为细胞结合型。MDV-1通常由呼吸道侵入机体, 但少见有在此复制的报道。由于MDV对淋巴组织有亲嗜性, 首先见到的显著损害为淋巴器官, 即脾脏、胸腺和法氏囊, 在这些器官感染后2~3d可检测到MDV抗原, 表现早期坏死性损害, 包括网状细胞和淋巴细胞, 特征为网状细胞增生和巨噬细胞及粒细胞浸润。随后胸腺和法氏囊萎缩导致免疫抑制。对淋巴细胞类群感染研究发现, B细胞可能是感染的靶细胞, 尽管有少量T细胞在早期发生溶细胞感染。法氏囊切除的鸡缺失B细胞, 不能在脾、胸腺引起溶细胞感染, 因而肿瘤发生率低, 从而证实了B细胞在早期发病中的重要性;