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气相色谱法测定草鱼不同组织中多氯联苯 多氯联苯（bts）是《福布斯公约》中受优先控制的12种永久性有机污染物之一。由于多氯联苯具有环境持久性、远距离迁移性和生物蓄积性等特点, 给人体健康和生态系统造成了潜在的威胁 由于动物性食品的组成成分十分复杂, 对其中多氯联苯的分析往往产生严重干扰, 因此样品的前处理至关重要。常用的前处理技术主要包括酸处理法 四大海味之首的鲍鱼, 是中国传统的名贵食材, 因其营养价值高、肉质脆嫩、味鲜美、含高蛋白质和相当丰富的脂肪、灰分、碳酸钙、胆壳素以及多种氨基酸等, 已经被越来越多的人群食用, 同时, 鲍鱼的食品安全问题也受到人们关注。但目前尚未有鲍鱼中多氯联苯含量测定的相关报道。由于多氯联苯具有亲脂性质, 一般积累在动物的富脂类组织中, 不同组织中脂类含量的差异会影响多氯联苯在各组织中的分布。本工作以鲍鱼的不同组织 (肌肉部分、内脏部分、整贝) 为分析对象, 采用超声波萃取法 1 试验部分 1.1 高速离心蒸发仪cog Varian GC-450型气相色谱仪, 配电子捕获检测器 (ECD) ;KQ-250B型超声波萃取仪;MS 2型涡旋混合器;Centrifuge 5810型高速离心机;R-215型旋转真空蒸发仪;N-EVAP 12型氮吹仪。 CNWBOND Carbon-GCB石墨化碳黑SPE小柱 (250mg/6mL) ;CNWBOND Florisil弗罗里硅土SPE小柱 (1g/6mL) 。 7种多氯联苯混合标准储备溶液:500 mg·L 正己烷、甲醇为色谱纯, 其他试剂为分析纯, 试验用水为二次蒸馏水。 1.2 ecd分离器进样口温度 DB-5MS毛细管气相色谱柱 (30m×0.25mm, 0.25μm) ;进样口温度260 ℃, ECD检测器温度300℃;载气为高纯氮气 (纯度99.999%) , 流量1.0mL·min 1.3 超声提取和再净化 将采集于水产品批发市场的鲍鱼样品去壳后, 分别取肌肉部分、内脏部分和整贝, 经高速组织匀浆机匀质后, 称取试样5.00g于50mL离心管中, 加入正己烷30 mL, 涡旋2 min, 以480 W功率在30℃下连续超声提取30min, 以6 000r·min 硫酸净化后, 用30g·L 由于硫酸净化后, 还有一些杂质干扰, 可通过石墨化碳黑柱和弗罗里硅土柱进一步净化, 石墨化碳黑SPE小柱和弗罗里硅土SPE小柱联合使用进行内脏部分和整贝样品的再净化, 肌肉部分样品只需使用弗罗里硅土SPE小柱进行再净化。 石墨化碳黑SPE小柱和弗罗里硅土SPE小柱使用前均先用5mL甲醇活化, 再用10mL正己烷活化。待SPE活化后, 加入正己烷溶解液2mL, 用正己烷10mL淋洗小柱, 收集到的淋洗液经氮气吹至1mL以下, 用正己烷定容至1mL, 按色谱条件进行测定。 2 结果与讨论 2.1 铬行为 按色谱条件对10μg·L 2.2 硫酸催化剂的净化 鲍鱼样品的成分极其复杂, 尤其内脏部分, 含大量的脂类化合物。通常采用硫酸酸化的方法能够除去生物样品中90%以上的脂类化合物, 该方法是一种非常重要而有效的方法, 广泛应用于多氯联苯分析。 试验采用硫酸酸化进行鲍鱼样品的初步净化。结果表明:肌肉样品, 加入2mL硫酸1~2次进行净化, 正己烷提取液颜色即不再变化;内脏部分和整贝, 通常需要加入2mL硫酸4~6次进行净化, 方可使正己烷提取液颜色不再变化。 2.3 净化条件的选择 鲍鱼不同组织提取液经硫酸净化后, 肌肉部分除杂效果较内脏部分和整贝好, 但仍有杂质对目标峰造成一定程度的干扰, 内脏部分和整贝杂质干扰比较大, 为了消除基体干扰以及减弱杂质对色谱柱的损害, 需经进一步净化进入气相色谱分析。由于弗罗里硅土SPE小柱主要用于除去脂肪酸、油类和脂类, 石墨化碳黑SPE小柱主要对色素的吸附非常理想, 样品经硫酸初步净化后, 仍然存在一部分色素、脂肪酸、油类和脂类, 尤其内脏部分特别明显, 但对于肌肉部分, 经硫酸净化后, 基本上没有色素的干扰, 只需采用弗罗里硅土SPE小柱进行进一步净化。因此, 试验选择将石墨化碳黑SPE小柱和弗罗里硅土SPE小柱联合使用进行内脏部分和整贝样品的再净化, 肌肉部分样品只需使用弗罗里硅土SPE小柱进行再净化。结果表明:采用该方法, 净化效果较好。 经SPE净化的鲍鱼内脏部分样品色谱图和经SPE净化的鲍鱼内脏部分加标 (2.5μg·kg 由图2可知:经过硫酸初步净化, 以及石墨化碳黑SPE小柱和弗罗里硅土SPE小柱的再净化, 杂质对目标化合物峰无干扰。 2.4 标准曲线和检出限制 按试验方法对1.25, 2.5, 5.0, 10, 20, 50, 100μg·L 2.5 样品加标回收率 分别称取鲍鱼肌肉部分、内脏部分和整贝样品5.00