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壁虎的实验动物化 如何饲养标准化的实验动物是实验动物研究的主要任务之一。生命科学, 尤其是医学的发展离不开实验动物科学的发展。随着医学科学的飞速发展, 研究的多样性、特殊性和国际性逐步提高, 对实验动物质量和品种也提出了更高的要求, 迫使实验动物工作者去野生动物资源中筛选适合的物种并将其通过人工驯养、繁殖, 对其携带的微生物进行控制, 明确其遗传背景, 使之成为标准的实验动物, 这个过程即被称作为实验动物化。 我国科学家经过数十年的努力, 在实验动物化研究中也获得了丰硕的成果, 开发培育了一批实验动物品种。如鼠兔, 树鼩等。壁虎又名蜒、守宫、天龙、蝎虎、壁宫, 为壁虎科动物无蹼壁虎Gekko suinhouna、多疣壁虎Gekko japonicus及其他几种壁虎的总称。属脊椎动物门、爬行纲、蜥蜴目、壁虎科。是一种药用动物, 具有补肺益肾、消咳等功效。并在仿生学、材料学和神经科学方面一直有其独特的应用, 但是长久以来只是作为一种实验用动物, 直接从野外捕获应用, 并没有被开发培育成实验动物品系。近年来随着对研究用壁虎数量和质量要求的提高, 壁虎的实验动物化也逐渐得到了重视。由于壁虎是两栖类冷血动物, 其实验动物化必然比哺乳类温血动物驯化困难, 这也注定了实验动物化是一个复杂的长期过程, 但在目前的实验条件下, 壁虎的实验动物化是完全可行的。 1 壁虎的生长与发展 近年来, 随着科学研究的深入, 壁虎已经广泛地应用在生物、医学、材料学、仿生学等学科。壁虎的脚足具有上百万根刚毛, 并能在任何性质的表面行走, 无论是亲水性的还是憎水性的, 研究表明这是由于壁虎刚毛具有范德华力黏合机制, 通过对这种机制的研究, Geim等制造出了具有极强黏合力的壁虎胶带。壁虎同其它蜥蜴类动物一样有一条尾巴, 遇害时常把尾巴断掉, 断尾不停的跳动, 以迷惑敌人, 这种观象叫做自截 (Autotomy), 是一种逃避敌害的自我保护行为, 对壁虎并不造成太大的伤害, 在一段时间之后壁虎会重新长出新的尾巴。自截现象如今得到科学家们广泛的关注, 我校江苏省神经再生重点实验室就是其中之一, 相关科研工作者希望通过各种实验来找到与断尾再生相关的基因, 并能将之运用到临床神经再生中去。顾芸等已经成功地建立了壁虎脊髓细胞的分离与培养方法。同时, 顾芸、刘梅等研究者还成功建立了壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化方法, 为壁虎脊髓再生过程中基因的研究提供细胞水平功能平台;壁虎在《吴普本草》、《本草经集注》、《新修本草》和中均有记载, 《本草纲目》描述其性味功用如下:“咸、寒, 有小毒。主治中风瘫痪, 手足不举, 或厉节风痛及风痉惊瘸, 小儿疳痢, 血积成痞, 疠风, 瘰疠, 疗蝎螫”“守宫所治风症惊痛诸病, 亦犹蜈、蝎之性能透经络也, 且入血分, 故又治血病疮疡。”后代本草记载守宫的功效, 皆源自李时珍的《本草纲目》, 并无多大发挥。国内学者证实了壁虎躯体及其制品在部分内科、外科和儿科疾病, 气道炎症和多发性心肌炎的治疗效果。 可见, 就新的实验动物开发而言, 壁虎作为一种实验材料已广泛应用于多种领域, 应用领域还在逐步扩大。随着我国科学技术的发展, 实验用壁虎在科学研究中将具有重要的实际应用价值, 尤其是可作为神经再生研究的重要模型。因此, 开发我国壁虎资源, 培育高质量实验用壁虎的需求已成为亟待解决的重要课题。 2 壁虎的繁殖情况 据文献报道该属动物在世界上有25种, 根据现有文献报道在我国分布有10种。由此可见, 我国的野生壁虎资源是比较丰富的, 具有较大的可供开发的基因库, 并且国内外对于壁虎繁育及微生物控制方面的研究比较深入, 因此壁虎的实验动物化已经具备了良好的基础。国外对爬行动物繁殖生态的报道甚多, 研究面亦较广, 这些研究主要反映了繁殖周期和繁殖特征与环境因子的关系, 实验室控制条件对性腺活动和繁殖周期的影响以及繁殖有关的物质和能量积累。计翔等用一年多的时间对多疣壁虎的繁殖生态进行了研究, 系统地揭示了多疣壁虎的繁殖周期和繁殖特征, 及其与季节和环境温度之间的关系。研究表明杭州地区多疣壁虎野外产卵期约在5月下旬至8月上旬, 具有产卵能力的雌体的平均个体选择体长 (SVL, snout-vent length) 为62.3±0.2mm, 雌体在繁殖期的产卵频率为1.8±0.2窝, 其中仅产一窝卵的约占26%, 产两窝的约占70%, 能产三窝的仅发现一例, 个体比较大的产卵频率亦较高。野外雌体约在4月上旬生殖腺迅速膨大增重, 到5月份达到峰值。5月下旬和6月上旬, 第一窝卵产出。从5月下旬至7月中旬, 雌体生殖腺波动较大, 8月为繁殖后期, 雌性性腺处于衰退状态。8月以后开始逐渐恢复, 但在整个秋季和越冬期一直保持繁殖以前的状态, 越冬结束后