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酸角中木草素高效液相色谱测定方法研究 酸角是蔷薇科植物的一个果实。它产于中国南方的一些省区，特别是四川附近的地区。酸角又名酸饺、曼姆、酸豆、通血香,味道甘、酸、性凉,有抑菌、降血糖之功效。常食用酸角可治腹泻、气胀、麻风病、麻痹、瘫痪,防治坏血病、胆汁过多,可杀死人体寄生虫:减缓酒精、曼佗罗中毒。 木樨草素(luteolin)是其中的主要黄酮类物质之一。本实验采用HPLC法, 测定了酸角中木樨草素的含量。现将结果报道如下。 1 木草素对照品 岛津LC-10A高效液相色谱仪;CLASS-VP5.03色谱工作站。 木樨草素对照品(购于中过药品制品检定所,批号040916);酸角(购于重庆铜君阁医药公司)经重庆市中药研究院傅善权主任技师鉴定,为酸豆Tamarindus indicaL. 的果实。 2 方法和结果 2.1 温度0.65%h3po4溶液 色谱柱为Phenomenex Luna C18;流动相为甲醇-0.05%H3PO4溶液(55∶45);流速,10 ml·min-1;检测波长350 nm,柱温为室温度。以木樨草素对照品计算,理论塔板数应大于2 500。 2.2 样品和样品溶液的制备 2.2.1 对照溶液的制备 精密称取木樨草素对照品适量,用甲醇溶液制成0.065 g·L-1的对照品溶液,0.45 μm滤膜过滤,备用。 2.2.2 试验溶液的制备 精密称取酸角果壳提取物,用甲醇溶解制成3.93 mg·ml-1的溶液,0.45μm滤膜过滤,备用。结果见图1～3。 2.3 标准曲线及线性范围 分别精密量取上述对照品溶液4,6,8,12,14 μl进样,以色谱峰面积Y对木樨草素对照品质量X进行线性回归统计,木樨草素的回归方程为Y=4.064 8×106X-696.71,r=0.999 8,线性范围为0.026～0.091 μg。 2.4 精密度实验 精密量取上述对照品溶液10 μl,连续进样6次,测得木樨草素的峰面积RSD为1.38%,表明进样精密度良好。 2.5 稳定实验 精密量取上述对照品溶液20 μl在0,2,4,8,16 h进样,测定木樨草素峰面积RSD为2.37%,表明样品溶液在16 h内稳定。 2.6 重复实验 取同一批药材,按供试品制备方法配制6份,分别进样10μl,测定木樨草素峰面积RSD为2.15%,表明该方法的重复性良好。 2.7 加样回收率试验 取同一供试品5份,分别加入木樨草素对照品溶液,按供试品溶液的制备方法制备,各进样10μl,计算得回收率为100.04%,RSD为1.13%,说明该方法回收率较好,方法可行。结果见表1。 2.8 木草素含量 按 2.2.2供试品溶液制备方法制成样品溶液各10μl进样,测定峰面积,由线性方程计算得木樨草素的含量为5.58×10-4%。结果见表2。 3 测定酸角含量的方法 3.1 酸豆在中国分布较为广泛,其果实有多种药理活性,具有一定的抗突变物质的活性,在国外已经有人开始研究,但国内在酸角的有效成分、药理活性研究等方面尚未见报道。本法将酸角果肉和果壳分开提取,分别用高效液相色谱仪进行有效成分的测定,方法稳定、稳定性和重现性较好,为开发我国酸角资源提供了一种含量测定方法。 3.2 从本实验结果看出,酸角果肉中不含木樨草素,而果壳中含有木樨草素,以前仅见酸豆叶子中含有木樨草素的报道。