清胰汤对香猪重症急性胰腺炎并发内毒素血症的防治作用.docxVIP

清胰汤对香猪重症急性胰腺炎并发内毒素血症的防治作用 临床观察显示，同时培养多器官功能不全。 综合征(Multiple Organ Dysfunction Syndrome,MODS)中,胃肠道是除肺以外最易受损的系统,其主要表现为应激性溃疡和肠麻痹,其中肠麻痹的发生率在50%以上,病死者中90%以上合并有肠麻痹;SAP 时肠麻痹的发生可导致肠道压力增加和细菌及毒素的过度产生,进一步引起肠道细菌及毒素的移位,从而使SAP严重化,进而并发MODS。本实验旨在研究SAP并发内毒素血症的机理及清胰汤对内毒素血症的影响。 1 材料和方法 1.1 试剂及试剂盒 清胰汤由栀子25g,丹皮25g,赤芍40 g,大黄40 g等组成,煎煮使药液浓缩1倍,遵义医学院附属医院制剂室提供。磺脱氧胆酸钠购自中国医药(集团)上海化学试剂公司产品。配成5%溶液,高压灭菌,4℃保存备用。内毒素测定试剂—鲎试剂盒购自上海伊华临床医学科技公司。胃泌素放免测定试剂盒购自北京北方生物技术研究所。胃动素、IL-1β、IL-6购自北京北免东雅生物技术研究所。 1.2 动物分组及模型建立 成年(12±2)月健康贵州香猪16头,体重20±2.5kg,雌雄不拘,随机分成2组:Ⅰ组为生理盐水组(SAP+NS);Ⅱ组为中药清胰汤组(SAP+CMQ);各组受试动物术前禁食12h、禁饮6h。参照邹树等的方法复制猪SAP模型。并行中心静脉插管、门静脉插管,胃造瘘。术后每天禁食补液[静脉营养热卡按(17.5±1.8)kcal/kg体重计算]。 1.3 虾注盐水与胃管推注 在制备SAP模型后2h,SAP+NS组经左颈外静脉滴注生理盐水(0.5ml/kg体重),同时经胃管推注生理盐水(5ml/kg体重),1日2次;CMQ组经胃管推注遵医Ⅱ号清胰汤浓缩液(5ml/kg体重),1日2次。 1.4 内毒素的测定 各组动物于制模前(pre-model,PM),制模后1h、6h、12h、24h、48h、72h、96h分别自中心静脉、门静脉采血,测定其内毒素、胃动素、胃泌素、IL-1β、IL-6的浓度。96h后处死动物,取胰腺、肠组织作病理切片,光镜下观察其组织、形态学变化。 1.5 统计学处理方法 实验数据按完全随对照设计的要求收集、整理,建立数据库,采用spss 10.0 for windows统计软件包进行数据的统计分析,同一时间点各组动物数据均以“xˉ±sxˉ±s”表示,采用两样本均数的双侧t检验;同一组内采用各时间点采用方差分析:P0.05为显著性差异;P0.01为非常显著性差异。 2 结果 2.1 两组患者h达峰值的情况 如Fig1.Fig2.所示,SAP诱发后1h,SAP+NS组门静脉,中心静脉血浆内毒素浓度开始升高,至48h达峰值,之后稍有下降,但仍处于较高水平,与制模前相比均有非常显著性差异(P0.01);治疗组在各时间点(除制模前、制模后1h外)门静脉、中心静脉血浆内毒素浓度与SAP+NS组相比均有非常显著性差异(P0.01)。并且门静脉血浆内毒素浓度在各时间点(除制模前、制模后1h外)均高于中心静脉血中的浓度(P0.01)。 2.2 制模前后的稳定性 SAP诱发后6h,SAP+NS组门静脉、中心静脉血清胃泌素浓度即同步升高,且随着时间推移而不断升高,至24h达峰值,之后开始下降,至96h时仍处于较高水平,与制模前相比有非常显著性差异(P0.01);治疗组在各时间点(除制模前、制模后1h外)血清胃泌素浓度与SAP+NS组相比均有非常显著性差异(P0.01)。 2.3 两组门静脉、中心静脉血浆胃动素开始下降比较 如Fig3.Fig4.所示,SAP发生后1h,SAP+NS组门静脉、中心静脉血浆胃动素开 始下降,且随着时间进行性下降,至96h时分别降至最低。治疗组在各时间点(除制模前、制模后1h外)与SAP+NS组相比均显著升高(P0.01)。 2.4 血清il-1、il-6变化 如Fig5.Fig6. Fig7.Fig8所示,SAP发生后1 h,SAP+NS组门静脉、中心静脉血清IL-1β、IL-6开始上升,至24h达峰值,之后有所降低,IL-1β至96 h时分别降至0.210±0.14ng/ml和0.170±0.028ng/ml;IL-6至96h时仍处于较高水平。治疗组除制模前、制模后1h外,其余各时间点与SAP+NS相比两者均有非常显著性差异(P0.01)。 2.5 大实性组织之变 SAP+NS组:胃和肠壁明显扩张,肠管呈暗红色或紫红色;胰腺外观肿胀,可见较大面积出血坏死灶(Square,S=60%左右);光镜胰腺可见大片状出血、坏死,间质大量炎症细胞浸润,胰腺组织可见大片状脂肪坏死及灶状钙皂形成,肠粘膜大片状坏死、剥脱,大量炎性细胞浸润,肌层间质血管扩张充血,肠腔内可见大量脱落的粘