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柞树菌根真菌不同配方培养基培养效果研究 细菌根的真菌能与萨尔共存，促进棕榈生长、耐寒、干燥、不育、生命力强、适应性强等。而对这些菌种的培养方法报导较少, 特别是对多种柞树菌根真菌三级种在不同配方上的生长状况, 未见报导。 本试验在《美味牛肝菌栽培成功初报》研究基础上利用7种柞树菌根真菌二级种分别接种在6个不同配方的培养基上, 通过观察三级种菌丝的生长期与菌丝密度的差异, 筛选出最适合各菌种生长的三级种配方。为柞树菌根方面的研究提供了重要依据。 1 材料和方法 1.1 材料表面 柞树菌根真菌1～7号, 三级种培养基1～6号, PDMN营养液, 丙烯袋 (规格为13cm×17cm) , 精密试纸等。 1.2 方法 1.2.1 营养液的调湿 FJM、FzhM、FJY、FzhY、CJM、FzhY。将已调好pH值的PDMN营养液稀释至原浓度的20%, 加入到料中并搅拌均匀, 以手握料见指缝湿润为宜 (料水比3.5∶1) 。然后分别装入丙烯袋中, 标记好。 1.2.2 高压消毒 将装好各种培养基的丙烯袋放入高压菌锅中 (压力1～1.5kg/cm2) , 灭菌2h, 等灭菌锅压力自然降至零 时, 再启盖取袋。 1.2.3 菌种的准备和接种 将灭菌后的培养基放进接种箱内, 用高锰酸钾与甲醛混合消毒1h, 具体操作为:先将装有培养基的丙烯袋口打开, 再将二级种瓶塞在火焰上方打开, 用接种铲迅速将菌块接到培养基上, 迅速扎口, 并在袋上注明菌种编号, 培养基编号以及接种日期。为了利于菌丝生长, 可将原先由于压力作用而过紧过硬的料用手捏碎、捏松。 1.2.4 不同菌种的感染培养 将接好种的培养基, 放置25℃ (±2℃) 的遮光恒温室内发菌, 在培养过程中, 每天观察记录菌丝生长情况, 并及时将杂菌感染过的菌种袋处理掉。 2 结果与分析 2.1 各菌株在培养基袋内生长的差异 通过连续2年的观察记录, 其菌丝生长情况见表1。 从表1可见, 不同菌种在不同配方培养基上的生长期存在着极显著的差异。各菌种生长速度最快的是2号、5号和7号。其中2号菌在1号和5号培养基袋内生长最快。生长期平均为7d;5号菌在5号培养基袋内生长最快, 生长期为7d;7号菌在5号培养袋内生长最快, 生长期为8d;1号菌在2号、5号袋内生长最快, 生长期为10d。长速相对较迟缓的菌种是3号和4号菌。 2.2 不同菌株在普遍培养基上的生长势 菌丝密度分为稀、疏、中、密、浓密5个等级, 分别以1, 2, 3, 4, 5表示;生长势分为细弱、弱、中、壮、粗壮5个等级, 分别以A、B、C、D、E表示。见表2。 从表2可以看出, 5号、7号菌种在多数培养基上均能保持良好的生长势, 菌丝生长丰满, 密度大, 有较为明显的菌丝束出现。而2号菌种虽然也有较为旺盛的生长势, 但菌丝的生长密度相比之下要小, 长势不如5号、7号丰满, 粗壮。 1号、6号菌的生长势明显不如5号、7号, 在培养基上的生长密度以及丰满程度与2号菌接近。 3号、4号菌的生长势, 生长密度是最弱的, 菌丝纤细, 呈现稀疏的细绒状。 3 生长优势比较 3.1 试验表明, 7号柞树菌根真菌在6种不同配方的培养基上生长存在着显著的差异。在1号、2号、5号培养基上, 大多数菌种都表现出了较强的生长优势, 菌丝生长速度、生长势均优于其它培养基, 因此更适合于在生产上的应用。 3.2 本试验不但筛选出了比较适宜柞树菌根真菌生长的三级种配方3个, 同时也筛选出了2号、5号、7号这三种生长势旺、易于培养的3种柞树菌根, 为今后继续分离、培养促进柞树生长的菌种, 筛选出更适宜菌丝生长的三级种配方以及进一步研究、开发和利用柞树菌根真菌打下良好基础。