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真胃灌注不同水平淀粉对泌乳性能和胃肠道发酵的影响
淀粉是祖母体内葡萄糖的一个重要前体。进入奶牛体内后,它经历了一个非常复杂的代谢过程。大多数的可消化碳水化合物在瘤胃微生物的发酵下变为短链脂肪酸, 如乙酸、丙酸和丁酸。因此, 大部分采食的淀粉在瘤胃内被分解, 到达小肠以能量的形式被吸收的就很少了。淀粉在瘤胃和小肠分布的比例影响蛋白质转化效率和能量代谢, 因此产生了许多的饲喂方式来提高过瘤胃可消化淀粉以增加动物体内葡萄糖含量, 例如加工处理或饲料组合。一般来说, 小肠内淀粉消化所吸收能量的利用效率高于瘤胃。小肠消化的淀粉由肠道吸收后转化为葡萄糖供反刍动物利用, 而瘤胃或小肠后肠段消化的淀粉则主要转化为VFA, 其中只有丙酸在肝脏葡萄糖合成过程中发挥作用。有研究表明, 增加小肠淀粉的消化可以增加乳蛋白产量, 这可能是由于节约了肠道和肝脏中氨基酸的利用。Nocek等指出, 没有确切的证据说明过瘤胃淀粉的消化能够增加产奶量或乳成分含量。然而, 近期一些研究表明, 瘤胃的发酵功能对于产奶量的贡献更大, 淀粉的消化从瘤胃转移到小肠和大肠对产奶量和乳成分有害而不是有益。本研究旨在探讨真胃灌注不同水平淀粉 (0、800、1 600、2 400 g/d) 对泌乳奶牛采食量、泌乳性能、胃肠道发酵和血液代谢的影响, 探究增加小肠内淀粉水平是否有利于生产性能的提高以及最适的水平, 为营养调控提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 平均产奶量、平均体重
选取4头安装有瘤胃瘘管的荷斯坦2胎奶牛, 平均泌乳天数为 (267±17) d, 平均产奶量为 (19.0±2.3) kg/d, 平均体重为 (621±35) kg。试验在中国农业大学延庆试验基地进行。由于试验结果可能会受到妊娠情况的影响, 本试验所用试验牛在试验期间均未参与配种。试验牛采用全混合日粮饲喂, 其组成及营养水平见表1。
1.2 试验设计
真胃灌注方法:通过将1个直径为6 mm的塑料管经过瘤胃插入真胃, 用1个直径18 cm的橡胶垫固定, 将淀粉溶液灌入真胃。
1.3 饲养方式2203232
试验动物在铺有橡胶垫的牛舍内栓系式饲养, 每天07:30和19:30饲喂, 07:00和19:00挤奶, 1 h自由活动, 自由饮水。
1.4 测量指标
1.4.1 肠道营养品质测定
记录正试期的采食量, 每头牛取800 g左右全混合日粮样以及剩料样, 并用直肠取粪法每天分5次共采集1 200 g左右的鲜粪。采集的样品放入烘箱内65℃烘48 h, 称重, 粉碎过1 mm筛, 保存待测。体重和体况评分在正试期第2天早上挤奶后4~6 h由3位实验员进行测定, 体重用胸围估测法, 体况评分采用5分法。
干物质 (dry matter, DM) 、有机物 (organic matter, OM) 、粗蛋白质 (crude protein, CP) 、中性洗涤纤维 (neutral detergent fiber, NDF) 、酸性洗涤纤维 (acid detergent fiber, ADF) 和淀粉含量的测定根据AOAC (1997)中的方法进行。
全肠道营养物质表观消化率用酸不溶灰分 (acid insoluble ash, AIA) 作为内源指示剂进行测定, 饲料、剩料和粪中AIA含量用4N-盐酸法测定, 计算公式如下:
式中:Ain为消化的AIA含量 (%, 干物质基础, 后同) ;Nin为消化的某营养物质 (干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和淀粉) 含量 (%) ;Af为粪中AIA含量 (%) ;Nf为粪中的该营养物质含量 (%) 。
1.4.2 近红外分析法测定乳脂、乳蛋白和乳乳含量
正试期内记录产奶量。分别在早晨和晚上进行奶样的采集。奶样滴加重铬酸钾并置于4℃保存, 送往北京奶牛中心用近红外分析仪 (Milk Scan605, 丹麦Foss公司) 测定乳脂、乳蛋白和乳糖含量, 计算产量和比率。按以下公式计算4%乳脂校正乳产量、能量校正乳产量、乳能量输出量。
1.4.3 淀粉酶活性测定
正试期的第1天07:30~19:30每隔3.0 h采集1次瘤胃液, 第2天往后推1.5 h, 样品为12.0 h内每1.5 h采集得到。采集后的瘤胃液用8层乳酪纱布过滤, 立即用p H计 (p HB-4型, 上海雷磁仪器厂) 测定p H。取2 m L滤液于冻存管中, -80℃保存, 用于测定淀粉酶活性。5 m L滤液在3 000×g离心15 min, 上清液-20℃保存, 用于测定挥发性脂肪酸浓度和氨态氮含量。淀粉酶活性用淀粉酶试剂盒 (南京建成生物工程研究所) 测定, 方法参考文献。5 m L滤液加入1 m L25%的偏磷酸用气相色谱仪 (M odel 7980, 美国Agilent公司) 测定
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