基因工程制药的研究进展.docxVIP

基因工程制药的研究进展 随着dna重建技术的发展，阐明剂价格是发展起来的。基因工程技术(Genetic engineering) 是现代生物技术的核心, 其快速发展, 使得融入了包括医学、生物学、化学和物理学等多学科最新研究成果的生物制药也已成为近些年来发展虽快的高新技术产业之一。不断研制成功并投放市场的生物技术药品和诊断试剂在为人们诊病、治病的同时, 更给人们带来了攻克和治愈各种疑难疾病的希望。 基因工程制药已经成为利用现代生物技术生产的最重要的产品, 并成为衡量一个国家现代生物技术发展水平的一个最重要的标志, 生物制药已成为制药业中发展最快和技术含量最高的领域。从1982年第一个新生物技术药物基因重组人胰岛素上市至今, 生物制药产业只有20余年历史, 约有100余种产品, 但这些产品在治疗肾性贫血、白细胞减少、癌症、器官移植排斥、类风湿关节炎、糖尿病、矮小症、心肌梗死、乙肝、丙肝、多发性硬皮病、不孕症、粘多糖病、Gaucher’s病、法布莱氏病、囊性纤维化、血友病、银屑病和脓毒症等, 在很多领域特别是疑难病症上, 起到了传统化学药物难以达到的作用。本文简要介绍以基因工程蛋白质药物为主的基因工程制药的概况。 1 合成互补药物 1.1 基因表达技术的发展 生物工程 (bioengineering) 主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程和发酵工程等5个部分。现代生物技术的核心是基因工程, 人工进行基因切割、重组、转移和表达的技术。基因工程诞生于70年代。自1978年成功地用大肠杆菌生产生长激素释放抑制因子以来, 人胰岛素、人生长激素、胸腺素、干扰素、尿激酶、乙肝病毒疫菌和肿瘤坏死因子等数十种基因工程产品相继问世;1982年开始进入商品市场, 在疾病防治中获得广泛应用, 并已取得或正在取得巨大的效果和收益。 1.2 工程菌的构建 基因工程技术是利用体外重组技术或PCR技术, 切割、加工修饰获得目的基因, 将重组对象的目的基因插入载体, 拼接后转入新的宿主细胞, 构建成工程菌 (或细胞) , 实现遗传物质的重新组合, 并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。 1.2.1 生物酶基因生物基因型 主要有逆转录法和化学合成法。①逆转录法:逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA, 在反转录成cDNA, 然后进行cDNA的克隆表达。②化学合成法:较小的蛋白质或多肽的编码基因可以用化学合成法合成。必须知道目的基因的核苷酸顺序或目的蛋白质的氨基酸顺序。用化学法合成目的基因DNA不同部位的两条链的寡核苷酸短片段, 再退火成为两端形成粘性末端的DNA双链片段, 然后将这些双链片段按正确的次序进行退火使连接成较长的DNA片段, 再用连接酶连接成完整的基因。 1.2.2 重组质粒或细胞 获得目的基因 (DNA特定片段) →选择基因的合适运载体 (另一种DNA分子) 组建重组质粒→ (将重组DNA引入细菌或动植物细胞并使其增殖) 构建工程菌 (或细胞) →培养工程菌 → (蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、细胞生长因子及单克隆抗体等) 产物分离纯化→除菌过滤→半成品检定→成品检定→包装。 1.2.3 工程科学研究体系 (见表2) 。 1.3 工程药物和科学研究药物 基因工程治疗药物, 基因工程抗体和疫苗, 基因工程诊断试剂等。 1.3.1 抗凝剂、耐药因子和干扰的活性化合物 目前已上市和正在进行研究的主要为细胞因子药物、蛋白质激素、溶血栓药物、可溶性受体及粘附分子等。在治疗癌症、免疫性疾病、心血管疾病、抗病毒、血液病等方面发挥重大作用。重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF) 作用于造血祖细胞, 促进其增殖和分化, 其重要作用是刺激粒、单核巨噬细胞成熟, 促进成熟细胞向外周血释放, 并能促进巨噬细胞及噬酸性细胞的多种功能、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 在骨髓移植时促进中性粒细胞数的增加。治疗肿瘤化疗引起的中性粒细胞减少症。干细胞因子(SCF) , 是原癌基因c-kit表达产物的配体, 主要由骨髓基质细胞产生, 体内存在分泌型和跨膜型两种形式。有活性的干细胞因子为同源二聚体, 可刺激干细胞分化为不同谱系血细胞, 并刺激肥大细胞增殖。肿瘤坏死因子 (TNF)是人体内对肿瘤有直接杀伤作用的一种细胞因子, 可使瘤体缩小或消失, 对多种肿瘤的中晚期患者有一定治疗作用。白细胞介素(IL) 是非常重要的细胞因子家族, 现在得到承认的成员已达35个;它们在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用, 如:IL-1、IL-2、IL-6、IL-11、L-22等。干扰素(IFN) 根据产生细胞不同可分为α干扰素、β干扰素和γ干扰素三类。是一种广谱抗病毒剂, 并不直接杀伤或抑制病毒, 而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生