microRNA在自身免疫性肝炎中的作用机制研究进展①.docxVIP

? ? microRNA在自身免疫性肝炎中的作用机制研究进展① ? ? 赵海霞 雒 扬 李 汛 （兰州大学第一临床医学院，兰州 730000） 自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）是一种以转氨酶水平升高、血清自身抗体阳性、高IgG血症、界面性肝炎和肝组织浆细胞浸润为特征的自身免疫介导的慢性肝脏内生组织炎症反应［1］。尽管人们已对环境、遗传和表观遗传因素驱动的肝脏免疫稳态失调具有广泛了解，但AIH发病的潜在分子机制尚未明确［1］。AIH缺乏特异性诊断指标，目前诊断是基于临床表现、生化检查、血清免疫学和组织学表现的综合诊断［2］。糖皮质激素加硫唑嘌呤是AIH的标准治疗方案，但仅对70%～80%患者有效，且常见药物副作用及不良反应［1］。AIH未经及时诊断和有效治疗可迅速发展为肝衰竭、肝硬化甚至肝癌［3-4］。因此，阐明AIH的发病机制、寻找AIH的特异性标志物及新型治疗策略具有重要意义。 miRNA具有广泛调控作用，可潜在调节细胞各方面生物功能，在多种自身免疫性疾病中起关键作用，miRNA失调通常影响疾病发生、发展和预后［5］。miRNA与炎症相关通路的相互作用参与AIH发生发展，可作为AIH新的治疗靶点，并进一步证实miRNA也可成为AIH的生物标志物。故本文将miRNA对AIH的调控作用及其在AIH诊断、治疗方面的研究进展进行综述。 1 miRNA概述 miRNA是动、植物和某些病毒中发现的一类短小非编码RNA。1993年在秀丽隐杆线虫中发现 了第一个miRNA lin-4，2000年发现了第一个人类miRNA let-7，目前miRNA数据库中标注了2 000多种人类成熟miRNA［6］。miRNA是一种内源性、进化高度保守的单链RNA，其长度约为22个核苷酸，可通过与靶mRNA互补序列结合干扰蛋白产生［7］。除翻译抑制外，miRNA还可吸引和招募mRNA限制因子，导致mRNA降解和基因表达中断，从而在转录和转录后水平调控目的基因表达［8］。人体内1/3左右基因在不同程度均受到miRNA调控，每个miRNA可调控数个靶基因，而同一个靶基因也可被多个miRNA调控［9-10］。因此miRNA对靶基因表达的调控作用在人类基因组中构成了一个庞大而复杂的网络系统，在各种生物过程中发挥重要作用。 2 miRNA生物合成 2.1 经典途径 初级miRNA（primary miRNA，primiRNA）是一种具有5＇端m7GpppN帽子结构和 3＇端多聚腺苷酸尾并折叠形成茎环结构的长达几百个碱基对的可变转录产物，在细胞核中由独立基因或编码蛋白质的DNA序列内含子经RNA聚合酶Ⅱ（RNA polymerse Ⅱ，RNA polⅡ）转录后产生。转录产生的pri-miRNA在细胞核中通过与包含RNA内切酶Ⅲ Drosha及其辅助因子DGCR8组成的微处理器复合物相互作用，被修饰为长度60～200个核苷酸的前体miRNA（precursor miRNA，pre-miRNA），pre-miRNA通过GTP依赖的核质/细胞质转运蛋白Exportin5（RanGTP/exportin-5）复合物将其从细胞核转运至细胞质，在细胞质中再由另一种RNA内切酶ⅢDicer及其伴侣蛋白反式激活反应RNA结合蛋白（transactivation response RNA-binding protein，TRBP）将premiRNA末端的茎环结构剪切后产生长度约为22个核苷酸的miRNA双链体［11-12］。miRNA双链体中的引导链成为最终成熟的miRNA，参与RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex，RISC）形成，该复合体是促进特定miRNA与靶向mRNA结合的关键因子，其随从链因结构不稳定将被降解［13-14］。 2.2 非经典途径 非经典途径即miRNA生物合成的替代途径，经替代途径合成的几种不同类别RNA在结构和功能上与miRNA相似，但绕过了miRNA经典生物合成途径中的一个或多个步骤。经典途径中，Drosha和DGCR8是miRNA合成是必不可少的。因此，不依赖于Drosha和DGCR8合成miRNA的途径被认为是miRNA合成的非经典途径。非经典途径中，某些脱支内含子可被剪接体加工成套索状“mirtrons”，被套索状的脱支酶裂解，折叠为premiRNA发夹，随后，这种pre-miRNA同样通过RanGTP/exportin-5复合物转运至细胞质，以经典途径继续进行miRNA合成［15］。miRNA的生物合成过程如图1所示。 图1 miRNA生物合成Fig.1 Biogenesis of miRNA 3 miRNA在AIH中的调控作用 3.1 miRNA对AIH患者肝脏