视觉信号识别训练中猫外膝体细胞方位选择的实验研究.docxVIP

视觉信号识别训练中猫外膝体细胞方位选择的实验研究 成年人和人类的大脑仍然保持着相当多的神经可塑性。大量行为学研究结果显示,随着视觉任务的的训练,学习的成绩会稳步提高并能保持较长的时间,但这种可塑性发生在视觉通路的哪一级水平以及神经机制如何,仍处于争论之中,一般认为是发生在视觉信息加工的早期阶段,特别是初级视皮层(Charles, 1994; Fiorentini and Berardi, 1997; Dosher and Lu, 1999)。对听觉及躯体感觉学习的研究(Edeline, 1999; Kaas, 1999)发现,动物执行学习任务一段时间后,听区和躯体感觉区皮层以及皮层下部位均发生任务相关的代表区地域图 (Map)及神经元感受野(RF)特性的短期或长期变化。在猴中的研究已证实,伴随着方位识别学习成绩的提高,初级视皮层(V1区)部分神经元对训练方位光栅刺激反应的敏感性发生了特异性改变(Schoups et al., 2001)。这种学习诱导的可塑性是发生在视皮层本身还是源于直接向皮层提供视觉信息输入的外膝体尚无研究报道。弄清这一问题对进一步探讨视觉系统中学习相关的可塑性神经机制具有重要意义。本研究用不同方位的静止正弦光栅作为视觉学习任务,对成年猫进行行为训练,结合在位细胞外单细胞记录技术,试图证实在外膝体水平是否存在与学习任务相关的神经可塑性变化。我们选用猫为实验材料,不仅因为猫的资源比猴的丰富得多,而且因为猫的视觉系统已有大量、详尽的研究,其视觉通路是高等动物中研究得最清楚的一个模式动物。 1 材料和方法 1.1 视网膜病变cat 四只健康的成年猫(体重2.5-3.0 kg)取自中国科技大学生命科学学院实验动物中心,肌肉注射盐酸氯氨酮(Ketamine 25 mg/kg体重)实施浅麻醉后进行眼科检查,均无视网膜病变或影响正常视觉的眼科疾病。随机选取其中两只(Cat 1,Cat 2)用于行为训练,分别接受不同的视觉学习任务,另两只猫(Cat 3,Cat 4)用作对照。行为猫和正常猫分隔饲养在同一暗室的两个不同饲养室中,尽量避免接受外界环境的视觉刺激。正常猫饲养室中有充足的水和食物供应。行为猫每天被带到另一个暗室接受约2 h左右的视觉学习任务训练后,立即放回饲养室中,并给予充足的水供应和部分食物补给。 1.2 动物的视觉信号和动作 训练装置与其他研究者(Vandenbussche and Orban, 1983; Orban et al., 1990) 所用的基本相同(图1),主要由两部分组成:第一部分是计算机,包括与控制电路进行通讯连接的主机和用于呈现视觉信号的显示屏(Cathode ray tube, CRT);第二部分是控制电路(Electric controlling circuits)和食物奖赏系统,控制电路根据计算机指令程序性地自动启闭食物奖赏系统中的电磁阀(Solenoid valve)阀门,当阀门开启时,来自气泵(Air pump)的气压推动活塞,压出食物罐(Food container)中少量半流体食物,经管道流出给食口(Food feeder),调节阀门开启的时程及气泵输出的气压大小均可调节每次食物的奖赏量。动物通过分辨呈现的视觉信号,用鼻子触碰金属键(Nosekey)(左键或右键)以获得食物奖赏。显示屏到训练室中猫眼的距离约为57 cm。 视觉信号是用Matlab软件编写的水平、垂直方位静止条形正弦光栅,光斑呈圆形,直径8 cm(相当于8度视角),光栅空间频率为0.4 周期/1度视角,对比度为80%,平均亮度为19 cd/m2。为提高行为猫(Cat 1/Cat 2)对特定方位正弦光栅的注意力,在两只猫的训练中均加入了第二个视觉信号——不含正弦光栅的空白光斑,其大小及平均亮度与条形正弦光栅的光斑相同。条形光栅与空白光斑随机出现,动物碰左键或右键获得食物奖赏。前后两次信号出现的时间间隔为4 s。每次信号呈现的时间为4.35 s,呈现开始的0.35 s为反应不应期(Response denied period,RDP)。动物碰键后,无论对信号识别正确与否,信号均消失。信号消失后动物碰键亦被视为无效行为。 行为训练每3天为一个训练段,每天训练6节,每节训练100次,两节之间动物休息5-10 min。每天训练时,先进行1节的适应训练,再进行2节的测试,然后进行3节训练,测试期间动物完全由自己进行信号识别和碰键。当猫对训练信号识别的正确率连续1周到85%以上时,用与训练方位垂直的条形正弦光栅检测,并统计猫对非训练方位条形光栅识别的正确率。 1.3 动物视网膜外观观察和测量 行为训练与检测结束后,用钨丝电极(阻抗2-8 MΩ)分别细胞外记录行为猫与正常猫dLGN神经元对不同方位条形光栅刺激的反应。记录方法与以