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不同夜温对薄皮甜瓜内源激素的影响 0 不适宜温度对薄皮甜瓜生产及内源激素含量的影响 [研究意义]中盛甜皮生物的栽培往往存在不适合温度的状况，其中，由于水果在夜间不合适温度下生长。因此, 弄清夜间不适宜温度对薄皮甜瓜果实生长发育影响的相关机理, 进而制定调控不适宜温度胁迫下薄皮甜瓜果实发育的措施, 对于提高设施薄皮甜瓜产量和品质具有重要意义。【前人研究进展】一些研究已表明, 不适宜温度胁迫对果实生长发育及品质的影响, 主要是通过对植物光合物质生产、分配、积累和代谢以及物质吸收等的影响而引起的, 其中植物内源激素是调节植物光合物质生产、分配、积累和代谢以及物质吸收的重要物质, 与果实发育密切相关, 而且, 果实的生长发育及成熟是多种激素综合作用的结果。有关不适宜温度对植物内源激素影响的研究, 目前在番茄、黄瓜等作物上已有一些研究报道, 但这些研究报道未能说明植物内源激素与果实生长发育间的关系。【本研究切入点】有关不适宜温度对薄皮甜瓜果实中内源激素含量的影响方面鲜见研究报道。【拟解决的关键问题】本研究通过分析果实膨大期夜间不同温度对薄皮甜瓜果实内源激素含量的影响, 探讨薄皮甜瓜果实内源激素对夜间不适宜温度胁迫的应答及其与果实生长间的关系, 以期为制定不适宜温度条件下设施薄皮甜瓜栽培技术措施提供依据。 1 材料和方法 1.1 供试品种及处理 试验于2007年2-6月在沈阳农业大学工厂化高效农业技术研究中心科研基地日光温室内进行。供试薄皮甜瓜 (Cucumis melo L.) 品种为‘玉美人’, 2007年2月5日播种, 穴盘育苗, 4月4日分苗至25 cm×25cm的塑料桶中, 定量浇水, 单干整枝, 12~14节位留瓜, 1株留1个瓜, 21节位去生长点。开花后7 d移入人工气候室进行夜间9、12、15、18℃处理, 处理天数为18 d, 昼温为26℃。人工气候室夜温处理方式和其它环境条件见下表。 1.2 微生物用量对果实内源激素含量测定的影响 取样时期为夜间低温处理的0、3、6、9、12、15和18 d, 取样部位为不同夜间温度处理条件下大小一致的甜瓜果实中果肉5 g, 液氮速冻, 超低温冰箱-80℃保存备用, 用于果实内源激素含量的测定。采用单株取样为1次重复, 共3次重复。 1.2.1 浸提液的制备 用10倍样品质量的80%冰冻甲醇提取。提取时样品放入预冷研钵中, 分3次加30 ml 80%的冰冻甲醇研磨至匀浆, 完全转入小烧杯中, 黑暗条件下 (0~4℃) 冷藏14 h以上浸提。之后用漏斗滤纸过滤, 清洗残渣, 合并滤液, 上清液转入冻干瓶中, 减压蒸干至5 ml (真空冻干系统, 型号MAXI dry Lyo) , 然后用2 ml 80%甲醇冲洗, 提取液中加入等量石油醚萃取脱色后再过C18小柱滤除色素, 之后转入蒸发皿中蒸干, 用1 ml甲醇溶解后, 用0.45μm滤膜过滤, 冷冻待测定。 1.2.2 回收率、标样与标样的制备 采用Waters高效液相色谱系统 (包括高压输液泵、紫外检测器、自动进样器和系统控制工作站) 测定, 利用外标法定量。参考方能虎等的方法并加以改进, 工作条件如下:色谱柱为C18反相柱 (5.0μm×250 mm, 5μm, Water公司生产) , C18Sep-pak小柱 (Classical Water公司生产) , 波长为260 nm, 流动相为甲醇﹕3%乙酸=45﹕55, 流速1 ml·min-1, 柱温35℃, 进样量20μl。激素标样均为Sigma公司生产的HPLC级试剂。另外, 除甲醇为色谱纯, 水为超纯水外, 其它试剂均为分析纯。将配制的混合标样 (含IAA、GA3、ZT、ABA) 经过上述纯化分离过程测定回收率, 以回收率对样品测定结果进行校正。通过标样计算样品中激素浓度, 并计算单位质量鲜样中的含量。 数据采用DPS软件、Origin及Excel进行分析。 2 结果与分析 2.1 夜间温度对薄皮南瓜果实内源素的含量的影响 2.1.1 夜间温度对薄皮南瓜果实红霉素含量的影响 2.1.2 夜温处理对玉米素含量的影响 从薄皮甜瓜果实玉米素含量变化看 (图1-B) , 各夜温处理均在果实膨大前期玉米素含量最高, 随后迅速下降, 在果实膨大后期又出现一个高峰, 且夜间9℃和12℃下峰值出现在处理后15 d, 而夜间15℃和18℃下峰值出现在处理后12 d。从各夜温处理间玉米素含量的差异看, 前期夜间15℃处理显著高于夜间18℃和9℃处理, 而夜间18℃与9℃处理间无显著差异。后期夜间12℃处理后玉米素含量显著高于其它处理。说明果实发育前期夜间15℃和后期夜间12℃可提高薄皮甜瓜果实玉米素含量, 而夜间18℃和9℃会影响其积累, 并且较低的夜间温度会使延迟后期玉米素小峰值的出现。 2