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微弧氧化纯钛材料骨诱导性及生物相容性研究 作为一种新型的医疗钛表面处理方法，微弧氧化的处理过程和处理后材料的表面生命力和毒性引起了许多科学家的关注和广泛的相关研究[1.4]。根据牙齿的特点，结合微弧氧化和电泳的基本原则，一些科学家在调整了工艺参数后，采用了改进的mao氧化，进行了材料测试和外生物理化试验。根据国家医疗生物化学评估标准gb和16186.6，对改进的mao方法处理的纯钛试件进行了骨移植试验，以评估材料在活骨组织中的生物兼容性和骨诱导。 1.1 材料与实验方法 健康新西兰大白兔9只(华中科技大学同济医学院实验动物中心提供),雌雄不限,植入试件均采用3mm厚的纯钛材料,400目硅酸盐砂纸表面抛光,裁成5×6mm大小钛片,共计27枚,MAO处理18枚,另外9枚作为对照,MAO主要参数选择如下:实验电压350伏,电解液主要成分为磷酸氢二钠(DSP)和乙酸钙(CA)构成,钙磷比为2.14。对照组用喷沙处理,使两种材料的表面形貌相似,植入实验前,所有试件均用大量等离子水冲洗,依次经丙酮,无水乙醇超声清洗10分钟,去离子水冲洗后烘干,常规湿热法消毒备用。 选取9只越2.5公斤重的成年新西兰大白兔,以保证植入材料能够全部植入骨髓腔。先剪去兔子一侧后腿术区兔毛,在大腿区作一长约3cm纵行切口,保持5mm的间距分别植入两枚MAO纯钛片及一枚相同规格钛片,术后严密缝合,碘伏纱布消毒并纱布包扎。手术后一周内每天肌注青霉素40万单位,并注意兔子的总体情况及伤口愈合情况,2个月后一起处死动物,将试件与周围骨组织整体取出常规10%的甲醛固定,或者试件取出做SEM及EDX分析。 ①术后动物评价及标本的肉眼观察,②组织学评价,包括观察钛-骨接触面有无纤维组织增生,有无骨组织生长,邻近组织变形及坏死情况,有无炎症细胞及程度,有无金属非金属脱落物。③试件的表面形貌及SEM及EDX分析。 2 结果 2.2 组织学观察 3 种植体的诱导骨生成能力及其生物生物环境 一种好的种植材料应该具备良好的生物相容性,最好还具有骨诱导性,作为种植材料,纯钛的生物相容性已经得到了公认,所以怎样让材料具有骨诱导性成为研究的热点。MAO钛材料是一种正在得到关注的技术,并且在体外的试验中得到了证实其具有很好的生物相容性,具有一定的诱导骨形成的能力,但是作为一种体内植入材料,还必须经过动物体内的长期、大量的植入试验,对于牙种植材料还必须进行骨内植入试验,进行生物相容性及生物力学评价及其他一系列的观察,马威等人作了皮下植入实验,得到了较为满意的结果,认为MAO处理的钛材料生物相容性与纯钛基本相同并且具有体内诱导磷酸钙盐在其表面沉积的能力,但是也有学者研究发现,MAO钛材料在植入动物体内后,表面发生类似溶解的改变。本试验力图通过把种植体直接植入兔子的胫骨骨髓腔,通过SEM和EDX检查及组织学观察来观察通过MAO的钛材料的诱导骨生成的能力及其生物相容性,并对其性能做一个综合评价。 纯钛是公认的具有良好生物相容性的材料,为了尽可能控制误差,故选择同批次具有相似表面的钛片作为对照来评价MAO处理对材料生物学性能的影响,除了符合有关医疗器械生物学评价的国家标准,还可以同时保证材料的理化性质接近,如硬度、形状,材料的表面形貌等,而且术前所用的试件表面清洗、消毒程序也完全相同,实验组和对照组种植在一个兔子上,术后取出时间也一致,同时作组织学检查及SEM及EDX分析,因此可最大程度上控制误差。 总体而言,任何材料对生物体都是一个异物,在植入生物体后均会产生免疫应答反应,但随着时间的增加,具有良好生物相容性的材料生物体免疫反应很小。在本实验中,实验组试件和对照组试件在植入兔子的胫骨后,动物术后未见明显的排斥反应,伤口愈合好,并且在其后的组织学观察中,试验组与材料接触的组织及新形成的骨组织均未见明显的异常细胞。这就说明试验组材料在生物相容性方面与纯钛没有明显的差异。 对于MAO处理后的材料的诱导骨形成的能力的研究,刘宝林等人关于皮下植入材料的改变的研究发现并认为材料表面有诱导钙磷沉积的能力,且材料表面的钙磷比例上升;Sul and colleagues等人的研究认为材料具有迅速诱导并与骨形成结合的能力,但是对于在钙磷元素及成骨细胞较为充裕的骨内环境,MAO纯钛材料诱导骨形成的能力怎样,未见报道。从本实验的观察及各项检查中,通过两个月的骨髓腔内植入后,材料表面形成一层均匀的200微米厚的骨组织。在SEM检查中,材料表面发生了明显的改变,材料表面发生了不均匀的溶解吸收,这与Matykina E等人的研究结果一致,EDX分析钙的比例均下降明显,磷的比例虽然无明显下降,但是通过分析,由于钛比例的上升,磷还是有下降。所以材料表面的改变与体外和皮下植入试验后的改变是有区别的,骨内植入的试验更加接近种植的真实环境